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仪器网>产品中心> 翌圣生物科技(上海)股份有限公司>分子生物>PCR>83倍Taq高保真酶Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase

83倍Taq高保真酶Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase

面议 (具体成交价以合同协议为准)
翌圣生物 2026-01-09 10:22:40
售全国 入驻:3年 等级:银牌 营业执照已审核
同款产品:PCR(28件)
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产品详情:

Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase,经基因工程改造而成。该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。酶溶液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的两种单克隆抗体,可简便地进行高特异性的Hot Start PCR,极大提高了扩增的检出率和产物的特异性。酶溶液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力,扩增目的片段的长度可长达13 kb。本产品配备了优化缓冲液,使得该酶适用于复杂模板的扩增。扩增产物为平末端。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品规格

10153ES10(10 U)

10153ES60(100 U)

10153ES76(500 U)

10153ES80(1,000 U)

10153-A

Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase

(1 U/μL)

10 μL

100 μL

500 μL

500 μL×2

10153-B

2×Canace® Plus PCR buffer(含Mg2+,dNTPs)

300 μL

3×1 mL

15×1 mL

30×1 mL

10153-C

6×DNA Loading Buffer

120 μL

1 mL

6×1 ml

12×1 ml

 

产品应用

基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库。

 

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA为模板/引物,74°C,30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1 U。

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存。有效期1年。

 

注意事项

1为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2本产品仅作科研用途

 

推荐PCR反应体系

组分

体积

终浓度

ddH2O

to 50 μL

-

2×Canace® Plus PCR buffer (含Mg2+,dNTPs)

25 μL

DNA模板 

适量

-

Primer正向 (10 μM)

2 μL

0.4 μM

Primer反向 (10 μM)

2 μL

0.4 μM

Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL)

1 μL

1 U/50 μL

【注】:1. 试剂使用:使用前要充分解冻混匀。

2. Mg2+终浓度:体系终浓度为2mM。如有特殊需要,可用50 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

3. GC模板:在体系中加入终浓度为3%的DMSO可能有利于扩增。

4. 不同模板的推荐使用量(25 μL反应体系)

模板种类

扩增片段1 kb-10 kb

基因组DNA

50 ng-200 ng

质粒或病毒DNA

10 pg-20 ng

cDNA

1-2.5 μL不超过PCR反应总体积的1/10

PCR扩增程序:有以下三种程序可选择,优先选择两步法程序。

 

两步法程序(优先推荐):     三步法程序(常规程序):

循环步骤

温度

时间

循环数

 

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

98°C

3 min

1

 

预变性1

98°C

3 min

1

变性

98°C

10 sec

30-35

 

变性

98°C

10 sec

30-35

延伸

68°C

30 sec/kb

 

退火2

60°C

20 sec

终延伸

72°C

5 min

1

 

延伸3

72°C

30 sec/kb

         

终延伸

72°C

5 min

1

                                                         

梯度温度退火程序(难扩增基因推荐程序)   *不同扩增程序下的特点:

步骤

温度

时间

循环数

 

程序类型

两步法

三步法

梯度退火

预变性

98°C

3 min

1

 

速度

最快

中等

变性

98°C

10 sec

15,每个循环降低1℃

 

特异性

中等

梯度退火

70-55°C

20 sec

 

PCR产量

中等

最高

中等

延伸

72°C

30 sec/kb

 

检出率

中等

变性

98°C

10 sec

20

   

正常退火

55°C

20 sec

   

延伸

72°C

30 sec/kb

   

终延伸

72°C

5 min

1

   

【注】:1. 预变性温度和时间:推荐温度:98°C,时间:3 min,高GC含量模板5-10 min。

2. 退火温度和时间:推荐温度:60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

3. 延伸温度和时间:推荐温度:72°C。时间:30 sec/kb,复杂模板根据实际情况可延长至60 sec/kb。 

 

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产品名称

货号

规格

2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye) 高保真酶预混液

10154ES03/08

1 mL/5×1 mL

Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶

10148ES60/76/80

100 U/500 U/1000 U

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10149ES03/08

1 mL/5×1 mL

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11004ES10

10 T

 

HB220407

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