PKI 14-22 amide, myristoylated |CAS 201422-03-9

PKI 14-22 amide, myristoylated是一种PKA抑制剂，它在N-端被肉豆蔻化，使其细胞的通透性增强。该肽的非肉豆蔻化版本是cAMP依赖性蛋白激酶的高度特异性抑制剂(Ki=36 nM)。HH-89和PKI (14-22) amide可降低IgG介导的吞噬反应。 

产品性质

运输和保存方法

冰袋运输。粉末直接保存于-20℃，有效期2年。建议分装后-20℃干燥保存，避免反复冻融。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 粉末溶解前请先短暂离心，以保证产品全在管底。

3. 请勿吸入、吞咽或者直接接触皮肤和眼睛。

4. 本产品仅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用浓度

【具体使用浓度请参考相关文献，并根据自身实验条件（如实验目的，细胞种类，培养特性等）进行摸索和优化。】

使用方法（数据来自于公开发表的文献，仅供参考）

（一）细胞实验（体外实验）

Myristoylated PKI (14-22) amide是一种有效的cAMP依赖性蛋白激酶(PKA)抑制剂，将悬浮在含Ca21培养基中的中性粒细胞(4 x10⁶/mL)在37℃下用Myristoylated PKI (14-22) amide、H-89或单独缓冲液预处理10分钟。然后使细胞(10⁶/mL)在37℃下粘附于经玻碳涂层(10 µg/mL)的载玻片上15分钟。在含有培养基(37℃)的A21中短暂冲洗后，将IgG或C3bi调理的FITC标记的酵母颗粒(5 x10⁶/mL)添加到载玻片上。在预处理过程中使用的试剂（H-89或缓冲剂）存在下，将制剂在37℃下放入管中15分钟。细胞在冰冷的PBS中漂洗，并保持在冰上，直到吞噬作用的定量。结果显示，HH-89和Myristoylated PKI (14-22) amide以类似的剂量依赖性降低了IgG介导的吞噬反应。但当浓度高于10 µM时，Myristoylated PKI (14-22) amide可以抑制中性粒细胞粘附，这使得无法进行吞噬功能测定。结果显示Myristoylated PKI (14-22) amide诱导的模式与H-89相似。PKAs在嗜中性粒细胞的吞噬作用中起关键作用。实验研究了cAMP和cAPK在中性粒细胞吞噬中的作用。H89对cAPK的抑制使补体和IgG依赖性吞噬分别减少到83%和46%。cAMP/cAPK在受体介导的吞噬过程中调节F-肌动蛋白重组，是通过IgG-FcR相互作用而触发的。^[1]

（二）动物实验（体内实验）

实验分别使用PKA-C抑制剂H-89或PKI 14-22酰胺，对曼氏血吸虫虫卵、尾蚴以及成虫进行刺激干扰，数据显示SmPKA-CmRNA的表达受发育调控，在尾蚴和成年雌性蠕虫中表达水平最高。为了评估SmPKA-C在这些发育阶段的生物学作用，我们用不同浓度的PKA抑制剂处理尾蚴和成虫。用H-89或PKI 14–22酰胺处理尾蚴会导致活性丧失，这表明与PKA作用在成人上一样，他也是感染性幼虫阶段的一种必需酶活性。在成虫中，体外暴露于亚致死浓度的H-89或PKI 14–22酰胺导致卵子产生的抑制呈剂量依赖性。PKA信号是尾蚴生存所必需的，并且可能在成虫的生殖活动中发挥特殊作用。在这项研究中，表明SmPKA-C在这些生命周期阶段中起着重要作用。特别是在成年雄性和雌性蠕虫中因此可以作为治疗和控制血吸虫病的一个有吸引力的治疗靶点。由于PKA在哺乳动物细胞中活性的失调与几种类型癌症的发病机理相关，PKI (14–22) amide可用作潜在的疗法，用于治疗这些癌症和许多与PKAs相关的其它疾病。^[1] [2]

参考文献

[1] Ydrenius L1, Majeed M, et, al. Activation of cAMP-dependent protein kinase is necessary for actin rearrangements in human neutrophils during phagocytosis. J Leukoc Biol. 2000 Apr;67(4):520-8.

[2] Swierczewski BE, Davies SJ. Developmental regulation of protein kinase A expression and activity in Schistosoma mansoni. Int J Parasitol. 2010 Jul;40(8):929-35 Chemical Properties.

HB221111