嗜热菌芽孢测试片纸片法

嗜热菌芽孢测试片说明书

一、原理

本测试片含有干粉培养基、指示剂和冷水可溶性凝胶。培养基提供嗜热菌芽孢生长所需营养；当有嗜热菌芽孢生长繁殖指示剂显红色。本测试片检测需氧嗜热芽孢。

二、包装规格

25片/包

三、检验方法

1.样品制备

①粮食制品

按常规方法制备样液（参考SN/T 0178标准），谷物50g加200mL无菌水以8000r~10000r/min均质3min备用；淀粉或者面粉20g加无菌水至100mL混匀备用；其它产品可参考SN/T 0178标准，选择稀释方法。

②乳与乳制品

   参考NY/T 1331标准，制备样液。取10g或者25g固体/半固体样品，加90mL或者225mL预热至45℃的稀释液（磷酸盐缓冲液或者蛋白胨-盐溶液），制成10^-1样液。如果有必要可以继续稀释，选择合适的稀释度备用。

2.接种

将测试片置于水平台面，揭开上层薄膜，吸1mL样液滴加于培养层，缓慢盖上上层薄膜，将匀液板有凹槽部分对准样液区域轻放于上层薄膜上，手指按住压环，同时在压环内轻轻按压，使样液在压环内扩散开，充满整个压环。粮食制品每个样品接种5片，接种好的测试片放于PET自封口袋中（5片/袋），封好口。乳及乳制品每个稀释度接种2片测试片，每片1mL样液，放入自封口袋中封好口。

3.蒸煮

接种好的测试片立即置于沸水浴或蒸汽柜中，粮食制品放置15min；乳及乳制品放置30min。

3.培养

蒸煮结束后将自封口袋打开5cm左右的口（以保证测试片培养时有充足的氧气供应），55℃±1℃保持一定湿度培养48h±2h。测试片放于平整处培养（可在培养箱中放一小块纸板），不可直接放于铁丝架上培养，容易使凝胶受挤压变形。

4.计数

培养结束后取出测试片，计数测试片上的红色菌落。谷物样品以5片测试片上的菌落数总和，再乘以8即为10g样品中嗜热芽孢总数；面粉或淀粉样品以5片测试片上的菌落数总和，再乘以10即为10g样品中嗜热芽孢总数。乳及乳制品按NY/T 1331标准计数。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。

四、储存

避光阴凉处保存，保质期12个月；已开封测试片放于自封口袋中室温保存，并于1个月内用完。