安捷伦|Agilent|AdvanceBio 表面活性剂分析 HPLC 柱，2.1 mm 快速保护柱|货号 821126-927|3 Pack

表面活性剂定量分析是一种成熟方法，通常采用混合模式色谱进行。该表面活性剂以单峰形式洗脱，便于轻松定量；然而，降解产物在死体积中洗脱，不适合对其进行分析。表面活性剂分析是一种新兴方法，可全面表征表面活性剂，包括生物治疗制剂中通过水解或氧化产生的降解物。该方法可及早发现问题，从而采取缓解措施并防止生产中出现代价高昂的质量问题。

聚山梨酯主要由 3 个部分组成：亲水性头部基团（如山梨醇酐）、4 条聚氧乙烯链，以及每条链末端的脂肪酸。水解是聚山梨酯降解的机制之一。水解会导致酯键裂解并释放脂肪酸，这可能导致颗粒的形成。水解可由酶或化学反应介导，但酶促降解更为常见。制剂缓冲液中可能存在残留的宿主细胞蛋白质，包括脂肪酶或酯酶等酶类，这些酶可能会引发水解反应。

聚山梨酯降解的第二种机制是氧化。当聚山梨酯暴露于光、过渡金属或残留的过氧化物下时，往往会发生氧化降解，其中后两者可能存在于制剂缓冲液中。聚山梨酯中的聚氧乙烯基团以及任何不饱和脂肪酸（如油酸或亚油酸）都可能发生氧化。不稳定的聚山梨酯反过来会破坏它要保护的蛋白质的稳定性。生成的氧化产物还可能导致生物制剂或其他制剂成分发生氧化。监管机构非常关注治疗药物的氧化现象。

泊洛沙姆 (Poloxamer) 是一种应用越来越广泛的表面活性剂，既可用于蛋白质制剂，也可用于腺相关病毒制剂。泊洛沙姆由一个聚环氧丙烷 (PPO) 单元和两个分别连接在 PPO 两侧的聚环氧乙烷 (PEO) 单元组成。泊洛沙姆的主要优点是不易水解。但它容易发生氧化，包括由于 PPO 和 PEO 骨架中的氧导致的自发氧化。与聚山梨酯类似，泊洛沙姆的氧化降解产物可能进一步诱导生物制剂或其他制剂成分发生氧化。

聚山梨酯水解会导致酯键断裂，使脂肪酸从聚山梨酯主结构中游离出来。聚山梨酯 80 和聚山梨酯 20 的主要脂肪酸分别为油酸和月桂酸。监测聚山梨酯中的游离脂肪酸是监测聚山梨酯降情况的有效方法之一。使用传统的反相方法，很难分离脂肪酸和单酯峰。而使用 AdvanceBio 表面活性剂分析柱可以实现这两个峰的高分离度分离，并且分析速度更快。