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Human Pro-collagen I α1 ELISA Kit 人I型胶原蛋白ELISA检测试剂盒
- 品牌:翌圣生物
- 产地:
- 供应商报价:面议
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
更新时间:2024-12-24 09:03:45
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销售范围售全国
入驻年限第1年
营业执照已审核
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详细介绍
I 型胶原蛋白(Pro-Collagen I alpha 1)是皮肤、骨骼和肌腱等结缔组织中含量最丰富的结构蛋白。它是一种合成的前胶原分子,其特征为300 nm的三重螺旋结构域,两侧是球状的N端和c端前肽。三螺旋结构域包含Gly-Xaa-Yaa三联体,其中Xaa和Yaa分别是脯氨酸和羟脯氨酸。前胶原蛋白N和C蛋白酶活性去除非螺旋前肽,因此成熟的三螺旋可以自组装成胶原原纤维,为组织提供拉伸强度。
翌圣Human Pro-Collagen I alpha 1 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人Ⅰ型胶原蛋白(Human Pro-Collagen I alpha 1)。特异性抗人Ⅰ型胶原蛋白抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人Ⅰ型胶原蛋白与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体(生物素标记)孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人Ⅰ型胶原蛋白的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号
97044ES48 / 97044ES96
规格
48 T / 96 T
检测范围
23.4-1500 pg/mL
检测方法
双抗夹心法
检测时长
4小时40分钟
灵敏度
10.2 pg/mL
稀释线性
80.9 - 118.0%
回收率
74.4 - 121.1%
板内差
6.3%
板间差
6.8%
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。
-
灵敏度检测
Human Pro-Collagen I alpha 1的最低检测限为10.2 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
-
精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定16次,评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。
项目
板内精密度
板间精密度
样本
1
2
3
1
2
3
16
16
16
24
24
24
平均值
649.1
152.6
40.1
684.6
164.6
42.8
标准差
34.74
8.53
3.14
42.16
11.69
3.08
变异系数(%)
5.4
5.6
7.8
6.2
7.1
7.2
- 回收率检测
通过不同水平的人Ⅰ型胶原蛋白添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:
样本类型
平均回收率(%)
范围(%)
血清
87.4
74.4-121.1
血浆
88.3
74.4-114.4
细胞培养上清
106.5
92.2-118.9
- 稀释线性检测
血清稀释比例
平均期望值(%)
范围(%)
1:02
96.8
89.3-102.2
1:04
100.0
93.9-106.1
1:08
99.7
92.7-105.6
1:16
94.7
80.9-102.6
血浆稀释比例
平均期望值(%)
范围(%)
1:02
108.3
101.3-116.1
1:04
107.2
101.9-114.7
1:08
105.9
99.5-113.1
1:16
104.7
91.1-118.0
细胞培养上清稀释比例
平均期望值(%)
范围(%)
1:02
99.1
91.1-107.1
1:04
92.0
87.4-96.6
1:08
88.4
85.0-91.8
1:16
84.6
79.6-89.5
- 样本值
应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。
样本类型
样本数目
平均值(pg/mL)
样本值(pg/mL)
血清
10
112.8
30.7-260.1
血浆
10
203.3
54.8-1088.2
细胞培养上清
10
0.02
n.d.-0.04
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得23.4 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人Ⅰ型胶原蛋白,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human:
BMP-1
COL2A1
COL-13A1
COL-3A1
COL-15A1
COL-4A1
COL-18A1
MFAP-4
COL-23A1
MRC-2
COL-25A1
检测简图
疑问解答
问题
造成原因
解决方法
标曲不好
移液量不准确
检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。
稀释方法不恰当
显色值偏低
孵育时间太短
给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。
移液量不足或稀释不当
校准移液器和规范操作
CV偏高
酶标板清洗不当
使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。
受污染的洗液
准备新鲜洗液
灵敏度较低
试剂盒储存不当
按照产品组分表进行保存。
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