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ArCas12a Nuclease (10 μM)

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详细介绍

产品简介

ArCas12a核酸内切酶,源自Agathobacter rectalis细菌的CRISPR系统,别名Cpf1,是一个包含1263个氨基酸的单体蛋白。作为CRISPR/Cas系统的II类(V型)成员,ArCas12a仅由单一的效应蛋白行使功能,其特性与Cas9存在显著差异,例如靶向富含T的基序、不需要反式激活crRNA、DNA双链断裂产生粘性末端、参与RNA加工、具有DNA核酸酶活性等。

Cas12a缺乏HNH结构域,可单独利用其RuvC结构域在CRISPR RNA(crRNA)引导下识别位于靶标核酸5’端富含胸腺嘧啶(T)的PAM区而启动对靶标DNA的切割,已成功用于许多哺乳动物和植物的基因组编辑。此外Cas12a还具有反式切割活性,可不加选择地切割反应体系中的非靶标单链DNA。

与其它LbCas12a/AsCas12a相比,ArCas12a具有更高的温度适应性(25-55℃),可适用于基因组编辑及核酸检测等。

 

产品信息

货号

14702ES65 / 14702ES80

规格

100 pmol / 1000 pmol

来源

大肠杆菌表达的来源于Agathobacter rectalisCpf1基因

分子量

149 KDa

PAM区

TTTN或TTTV

酶保存液

20 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5 @25℃

反应条件

50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2 , pH 7.9 @25℃

浓度

10 µM*

纯度

>95%(SDS-PAGE)

失活条件

85℃,5-10 min

*: ArCas12a Nuclease浓度为10 μM,即10 pmol/μL。

 

组分信息

组分编号

组分名称

14702ES65

14702ES80

14702-A

ArCas12a Nuclease (10 μM)

10 μL

100 μL

14702-B

10×ArCas12a Reaction Buffer

1 mL

1 mL

 

产品应用

1. CRISPR/Cas基因编辑;

2. 基于CRISPR/Cas系统的诊断和检测;

3. 联合核酸等温扩增技术(RPA和LAMP)的其他检测应用等。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用说明

1. 推荐配置应用反应与体系:

组分

体积

10×Arcas12a Reaction Buffer

3 μL

300 nM crRNA

3 μL (30 nM final)

1 μ MArcas12a Nuclease

1 μL (30 nM final)

Reaction volume

27 μL

30 nM substrate DNA

3 μL (3 nM final)

Nuclease-free water up to

30 μL

2. 在37℃下孵育1小时,然后在85℃下进行5-10分钟以灭活Arcas12a Nuclease,随后进行琼脂糖凝胶电泳以进行片段分析。

 

注意事项

1. 为防止RNase污染,请保持实验区干净整洁,操作时需穿戴干净的手套、口罩,实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。

2. 避免反复冻融。首次溶解之后,建议按照使用量分装保存。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途

 

Ver.CN20240318

 

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