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三代逆转录酶不含甘油Hifair® III Reverse Transcriptase,600U/μL,Glycerol-free

品牌：翌圣生物
产地：
供应商报价：面议

翌圣生物科技(上海)股份有限公司更新时间：2024-12-24 09:03:45

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详细介绍

Hifair^® III Reverse Transcriptase是在Hieff^® M-MLV (H^-) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶，与Hieff^® M-MLV (H^-) Reverse Transcriptase相比，其热稳定性大幅度提高，可耐受高达65℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时，该酶增强了与模板的亲和力，适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair^®III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升，可扩增长达19.8 kb的cDNA。Hifair^® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free第三代耐热逆转录酶（无甘油版）可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂等。

产品组分

编号	组分	产品编号/规格
编号	组分	11297ES09 (6 KU)	11297ES12 (12 KU)	11297ES75 (300 KU)
11297	Hifair^®III Reverse Transcriptase (600 U/μL)	10 μL	20 μL	500 μL

产品应用

冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂盒。

活性定义

以Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物，在37℃，10 min内，将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存，效期6个月。

注意事项

1. 请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。

2. 所有操作均应在冰上进行，防止RNA降解。

3. 为保证高效率逆转录，建议使用高质量的RNA样本。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

参考操作步骤

1. 体系配置：

组分	组分	使用量
13840-A	10×Bst Buffer	2.5 µL
13840-C	100 mmol/L MgSO₄	2 µL
dNTP Mix (100 mmol/L)	dNTP Mix (100 mmol/L)	3.5 µL
dUTP Mix (100 mmol/L)（可选）	dUTP Mix (100 mmol/L)（可选）	0.35 µL
11297	Hifair^®III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)	0.1 µL
10703	Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)	0.2 µL
13839（可选）	Heat Labile UDG (200 U/µL)（可选）	0.005 µL
10×Primers^a	10×Primers	2 µL
13840-B^b	Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)	0.5 µL
RNase free ddH₂O	RNase free ddH₂O	To 25 µL

【注】：

a. 10×Primers：16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each；引物组的比例也可以进行适当的调整。

b. 可根据实验具体情况来调整用量。

2. 反应程序设置

温度	时间	作用
37℃	2 min	消化
65℃	30-60 min^a	逆转录和恒温扩增
85℃	10 min	灭活

【注】：

a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光，1 min采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为13841的染料，通道选择SYBR，1 min采集一次荧光。

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