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Hifair<sup>®</sup> Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix

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详细介绍

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix基于Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase而开发的即用型预混液。与Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比,Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix为即用型预混液,包含Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase,RNase inhibitor,dNTP,Random primers/Oligo dT primer mix和优化的缓冲体系,只需再加入模板RNA和RNase-free ddH2O即可进行反应。

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

11137ES10 (10 T)

11137ES60 (100 T)

11137-A

RNase-free H2O

1 mL

2×1 mL

11137-B

4×Hifair® Ⅲ SuperMix

50 μL

500 μL

 

产品应用

适用于 RT-qPCR 实验。

 

运输和保存方法

冰袋运输。-20ºC保存,有效期18个月。

 

第一链 cDNA 合成操作步骤

逆转录反应体系

逆转录程序

组分

使用量

温度

时间

RNase-free H2O

To 20 μL

25℃

5 min

4×Hifair® Ⅲ SuperMix

5 μL

55℃

15 min

Total RNA

10 pg -5 μg

85℃

5 min

or mRNA

10 pg-500 ng

   

【注】:1. 20 μL逆转录反应体系建议Total RNA的投入量不超过1 μg。如果目的基因的表达丰度低,最多投入5 μg Total RNA;

2. 逆转录温度:推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃。

※ 逆转录产物可立即用于后续qPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

 

注意事项

1.可以室温溶解,溶解后宜存放于冰盒内或冰浴上,使用完毕后应立即置于-20℃保存。

2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3.本产品仅作科研用途! 

HB220308

 

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