什么是凝胶电泳阻抑法

yaaaaler 2013-07-25 蛋白电泳浏览 547 次

说是在检测DNA片段与蛋白质的相互作用常用的技术为凝胶电泳阻抑分析，请问凝胶电泳阻抑法的原理是什么啊？？？

精彩问答

疯狗图片发布日期：2013-07-26

　　凝胶阻滞分析（Gel shift Assay），该方法用来研究DNA与特异性蛋白的相互作用，通常是放射性标记的DNA片段与纯化蛋白，或提取物中的蛋白混合物相结合，然后在非变性凝胶中分析该产物。与游离DNA相比，蛋白-DNA复合物的迁移率将降低，因此，与游离DNA相对应，人们将观察到带中的“阻滞”。
　　又称Gel Shift assay 或Electrophoretic Mobility Shift Assay（EMSA）凝胶阻滞分析。是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术，Z初用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用，可用于定性和定量分析。
　　其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合，电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢，即表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白，并可通过加入特异性的抗体（supershift）来检测特定的蛋白质，并可进行未知蛋白的鉴定。

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