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用定量pcr检测血液中两种细胞因子在刺激后的表达

yuan605181572    2009-05-09    血液核酸提取    浏览 471 次

在猪身上采血后,用LPS和Poly(I:C)刺激血液,我想用定量pcr检测两种细胞因子(IL和INF)的表达问题:1.我如何在NCBI找到这两个细胞因子的mRNA序列?具体一点说,谢谢2.想用q-pcr检测m... 在猪身上采血后,用LPS和Poly(I:C)刺激血液,我想用定量pcr检测两种细胞因子(IL和INF)的表达
问题:
1.我如何在NCBI找到这两个细胞因子的mRNA序列?具体一点说,谢谢

2.想用q-pcr检测mRNA的表达 ,设计引物需要跨内含子么?

3.提取总RNA后,需要再提取mRNA么?还是直接用总RNA检测?如果我真的设计了跨内含子的引物,如何保证扩增利用的模板RNA已经是切除了内含子的?

问题比较多,回答的好一定追加分数,决不食言! 展开

精彩问答
碳噫9勺 发布日期:2009-05-10
搜索猪的细胞因子(IL和INF)的核酸序列,进“all database”,选“nucleotide”进行搜索,可以得到一些序列,点进去找,看有没有细胞因子(IL和INF)的编码序列

设计引物Z好是在目标序列的前后较接近的地方

再提取mRNA会更好
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