Z近的预印本杂志bioRxiv发表了德国波恩大学,夏里特大学,德国马克斯·普朗克精神病研究所等单位联合研究成果,阐述了SARS-CoV-2病毒可以YZ自噬。亚精胺,MK-2206,氯硝柳胺等作用于自噬的小分子化合物,可以作为抗病毒潜在ZL药物。
Analysis of SARS-CoV-2-controlled autophagy reveals spermidine, MK-2206, and niclosamide as putative antiviral therapeutics(bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.04.15.997254)
--研究摘要--
严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)对公共卫生和世界经济构成严重威胁,至今没有批准的特 效药物或疫苗。代谢依赖的细胞途径的药理学调节,如自噬,减少了传播高致病性中东呼吸综合征(MERS)-CoV。(该单位之前研究,SKP2 Attenuates Autophagy Through Beclin1-ubiquitination and Its Inhibition Reduces MERS-Coronavirus Infection, Nat Commun, 10 (1), 5770 2019 Dec 18.)
本研究,作者发现SARS-CoV-2感染通过干扰多种代谢途径来限制自噬。体外靶向自噬诱导的化合物可以减少SARS-CoV-2在体外的释放。对自噬信号和代谢组学的深入分析表明,SARS-CoV-2通过限制AMP-蛋白激活激酶(AMPK)和mTORC1的激活,来减少糖酵解和蛋白质翻译。感染还下调了自噬诱导的亚精胺,并促进AKT1/SKP2依赖途径自噬启动蛋白Beclin-1(BECN1)降解。外源性给药亚精胺、AKTYZ剂MK-2206和稳定Beclin-1、抗螺旋肽药物氯硝柳胺分别YZSARS-33CoV-2的释放达到85%、88%和99%。可以作为潜在的抗SARS-CoV-2的药物。
--Wes全自动定量Western Blot检测ATG14天然寡聚体--
ATG14是新冠病毒感染,YZ自噬信号通路中的关键蛋白,其寡聚体降低的水平反应自噬被YZ的水平。
Wes全自动定量Western blot所有结果为全膜数据,可以在单次实验中,同时检测蛋白单体及其寡聚体,并定量变化。
Fig.2: SARS-CoV-2 hijacks autophagy signaling on multiple regulatory levels. VeroFM cells were infected with SARS-CoV-2 319 (MOI = 0.0005) and harvested at 8 h, 24 h, or 48 h post infection (h p.i.). Protein levels and phosphorylation status of selected autophagy-relevant proteins were determined by Western blotting. For analysis of ATG14 oligomers (bottom panel, left) cells were incubated with a chemical crosslinker (DSS) 2 h prior to cell harvest (for detailed protocol see methods section). Cell extracts were separated and immunoblotted using Wes (ProteinSimple) capillary electrophoresis. Error bars in all panels denote standard error of mean derived from n = 3 biologically independent experiments. Tp < 0.1, *p < 0.05, ***p < 0.001 (one-way ANOVA; Bonferroni correction (post hoc)).
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