mRNA疫苗开发的工艺流程

在疫情仍未停歇的当下，做好个人防护对每个人来说既是简单的，又是必要的。而群体防护的顺利实施，则要归功于抵抗新冠的各类疫苗了。这其中，就有免疫效果不错的mRNA疫苗。mRNA疫苗具有广泛的应用领域和显著的治疗优势，因而成为诸多药企竞相追逐的热点。本期，小编就带大家了解一下mRNA疫苗开发的工艺流程。

01 DNA原液供应

质粒 DNA (pDNA) 是mRNA疫苗生产不可或缺的原材料，可用作 mRNA 的模板。在制备时，第一步是要提取病毒刺突蛋白的DNA序列，然后构建带有该序列的DNA质粒，接着经过扩增、纯化、质检等诸多过程形成我们最终所需的DNA原液。

在mRNA疫苗开发应用方面，质粒生产也面临着诸多的压力，尤其是 GMP的压力。

02 mRNA原液制备 体外转录（IVT）是mRNA原液制备的主要手段。pDNA 可作为IVT的模板，合成所需的 mRNA 分子。 IVT的工艺比较复杂，除使用pDNA外，还需要添加合成mRNA的必要成分，如核苷酸和mRNA聚合酶。为提高mRNA稳定性，降低其免疫原性，还需在 mRNA的5'末端添加加帽试剂。除此之外，合理设计5'或3'非翻译区(UTR)也可以调整mRNA的稳定性及蛋白质的翻译效率。 mRNA的纯度影响着翻译后蛋白的效力，因此，mRNA原液制备后的纯化过程也是必不可少的，可采用TFF（切向流过滤）或SEC（尺寸排阻色谱）等方法来去除少量残留杂质。

03 mRNA包封 为防止疫苗有效成分mRNA进入细胞前被降解，可采用脂质纳米颗粒(LNP)对其进行包裹。具体过程为：将各种脂质成分按一定的比例进行混合，溶解在乙醇或其他有机溶剂中；将mRNA溶解于水中，并用酸性缓冲液稀释至合适浓度。配置好的两相溶液在微流控设备上进行均匀混合，快速制备包裹mRNA的核酸脂质纳米颗粒。与微流控设备匹配的核心耗材为微流控芯片，图1即为芯片内部通道示意图。 

图1.微流控芯片通道示意图

04 后处理 mRNA包封后需要进一步的纯化。可通过超滤去除有机相以及未包封的游离成分。超滤过程中可以进行溶剂缓冲体系的置换，以及PH值的调节，最终复合物的浓度根据需求进行灵活控制。 

图2.超滤管

 至于细菌、微生物的清除，一般采用0.22μm的除菌级过滤器即可。 纯化后的mRNA-LNP溶液还可以添加必要的辅料成分，以提升产品长期保存的稳定性。

05 储存运输 mRNA疫苗布局开发过快也带来了些不可避免的问题，即需要低温来保持疫苗稳定，这大大的提升了对储存和运输的要求。在储存运输过程中需进行持续的温度监测，以确保产品始终处于规定的温度范围，否则很难保证最终患者给药时产品的安全性和有效性。 总结：mRNA疫苗有着广阔的应用前景，其开发过程也必然充满挑战。了解开发的各个工艺流程，方能锁定难点，各个击破，向疫苗的成功开发更进一步。  

纳米药物制备系统

应用范围：

● 核酸药物发展的前沿方向

● mRNA疫苗的开发与挑战

● 核酸脂质纳米粒科普——浅谈仪器参数对结果的影响

● 核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格

● 核酸脂质纳米粒科普——后处理

 
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显微计数法不溶性微粒仪应用于mRNA疫苗注射剂

随着2019年疫情在大范围内的大流行，新冠疫苗也再一次被人们重视起来，今天梓梦科技的小编就想和大家聊聊关于mRNA疫苗检测时需要用到显微计数法不溶性微粒仪检测的问题。

在说具体的显微计数法不溶性微粒仪检测的流程之前，梓梦科技的小编先介绍一下什么是mRNA疫苗。众所周知，mRNA疫苗是继灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗和病毒载体疫苗后的第三代疫苗,具有针对病原体变异反应速度快、生产工艺简单、易规模化扩大等特点，它的基本原理是通过特定的递送系统将表达抗原靶标的mRNA导入体内，在体内表达出蛋白并刺激机体产生特异性免疫学反应，从而使机体获得免疫保护。我们都知道当mRNA疫苗研发成功之后不能被立即使用，在使用之前是需要进行检测的，这时候对于mRNA疫苗的检测方法就需要显微计数法以及需要使用显微计数法不溶性微粒仪来检测。下面就让小编给您介绍一下进行显微计数法不溶性微粒仪检测时需要用到的配件展示。

显微计数法不溶性微粒仪配件展示：

（1）样品过滤装置，烘干装置，检测分析软件，电脑等。

（2）需要配置奥林巴斯反射显微镜、徕卡金相显微镜、尼康金相显微镜或者国产反射系统显微镜均可。

显微计数法不溶性微粒仪仪器展示：

mRNA疫苗样品展示：

以下是具体的显微计数法不溶性微粒仪检测步骤：

（1）首先对空白滤膜进行检查，将空白滤膜放置于测试平台，对整个滤膜进行扫描后做分析，确保滤膜本身是干净的。

（2）把滤膜润湿之后放置在过滤装置上，固定后倒入样品，进行抽滤，然后用50ml检查用水冲洗。

（3）将滤膜取出，放入到金属浴中进行烘干，烘干温度45℃，一般大约10分钟左右即可。

（4）用专用平头镊子将烘干的滤膜放入显微计数法不溶性微粒仪下，进行整图扫描。

（5）分析实验数据，导出标准报告；

通过以上梓梦科技的小编介绍的显微计数法的检测步骤，很多感兴趣的朋友肯定会疑惑，拥有显微计数法不溶性微粒仪和会使用显微计数法检测的的公司那么多，为什么还要梓梦科技的显微计数法不溶性微粒仪来检测呢？原因是梓梦科技的显微计数法不溶性微粒仪MIP-01Z具有以下的优势：

①　直接按照药典要求出具报告；

②　全自动进行滤膜全扫描，并进行颗粒图片分析；

③　软件符合法规要求；

④　按照颗粒性质进行归类分析统计；

⑤　光阻法检测不通过时，作为不溶性微粒检测的一个判定。

通过梓梦科技小编的介绍，相信对显微计数法如何检测mRNA疫苗的流程的朋友都已经清楚了，如果对梓梦科技的显微计数法不溶性微粒仪感兴趣的朋友欢迎咨询上海梓梦科技。

一、喷雾干燥机的工艺流程分为两种：

       1：开式喷雾干燥机

       2：闭式喷雾干燥机

       3：真空喷雾干燥机

二、开式喷雾干燥机介绍：

       开式喷雾干燥机包括：普通型实验室用喷雾干燥机、气流喷雾干燥机、低温喷雾干燥机、离心喷雾干燥机、喷雾造粒干燥机、布袋式喷雾干燥机等，这些均为开式喷雾干燥机，

开式喷雾干燥机工艺流程：

       将原料液体通过雾化器分散成雾状液滴并用热气体（空气，过热蒸汽）干燥液滴来获得产物的干燥方法。 喷雾干燥的原料液体可以是溶液，乳液，悬浮液或熔融液体或糊剂。 干燥的产品可以根据需要制成粉末，颗粒，空心球或颗粒。 液体雾化将物料液体分散成液滴的雾化器是喷雾干燥的关键组成部分。

三、闭式喷雾干燥机介绍

       是将W/O型溶液，由于干燥过程中的挥发成分一般为有机溶剂，易燃易爆，甚至有毒，必须回收，因此应采用惰性气体作为干燥介质的封闭循环干燥过程。

四、真空喷雾干燥机介绍

       干燥机是一种处理溶液、悬浮液或泥浆材料的干燥机。喷雾干燥机采用喷雾法，使物料分散在热气流中，物料与热空气并流、逆流或混流接触，使水迅速蒸发，达到干燥的目的。采用这种干燥方法，可节省浓缩或过滤等化学单元操作，可获得颗粒产品，干燥时间短。