利用 LC/MS/MS 定量测定人血清中的一组内源性类固醇

Agilent Chem Elut S 固相支持液液萃取 (Chem Elut S) 使用合成填料，比传统硅藻土具有更出色的一致性和更高的持水容量。本研究展示了采用 Chem Elut S 2 mL 96 孔板对人血清中的一组共  15  种内源性类固醇进行  LC/MS/MS  定量测定。使用固相支持液液萃取  (SLE)  对血清样品进行前处理，以提取目标分析物，并去除基质干扰物质，如盐、蛋白质和部分磷脂。整个样品处理在  96  孔板中作为一个批处理进行，首先将水溶液样品加载到  SLE  吸附剂上，然后使用与水不混溶的溶剂进行重力洗脱。与传统的液液萃取  (LLE)  相比，Chem  Elut  S  的板内工作流程可大大节省时间和人力。针对血清中目标类固醇浓度为  5–10000  pg/mL  的宽校准范围（雌二醇和睾酮的校准范围为  10–10000  pg/mL，氢化可的松、17-羟基孕烯醇酮和孕酮的校准范围为 20–10000 pg/mL），对建立的 SLE 方法进行验证，该方法表现出优异的方法分析物准确度 (80%–120%) 和重现性 (RSD < 15%)。还对方法选择性和交叉污染进行了评估，五种分析物定量限  (LOQ)  升高归因于方法在血清基质中的选择性。此外，在给定的样品萃取溶剂下，合成的 SLE 吸附剂与基于硅藻土的 SLE 以及传统 LLE 相比，能够更好地去除生物体液基质中的磷脂。