GX液相色谱法测定人血浆中内源性尿嘧啶二氢尿嘧啶含量

色谱柱: Diamonsil C18 4.6 × 250 mm, 5μm(Cat#:99603)

流动相: 0．01 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 5．5)-乙腈，梯度洗脱方案见表1

流速: 0.8 mL/min

柱温: 4℃

进样量: 40μL

检测器: UV 204 nm(O～14．5 min)，254 nm(14．5～35 min)

摘要：目的:建立准确测定内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的GX液相色谱法.方法:以氟尿嘧啶(5-FU)为内标,醋酸乙酯-异丙醇混合液(85:15)为提取溶剂;色谱柱Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 靘);流动相A-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.5),B-乙腈,梯度洗脱;流速为0.8 mL·min-1;柱温为4 ℃;检测波长为204 nm(0～14.5 min),254 nm(14.5～35 min).结果:尿嘧啶和二氢尿嘧啶线性范围为8～500 靏稬-1,线性回归方程分别为C(UH2)=61.760 8Y+0.506 5,r=0.999 8;C(U)=95.201 1Y-3.064 0,r=0.999 3,(n=7).Zdi检测质量浓度均为5 靏稬-1.尿嘧啶方法回收率为99.3%～107.0%,二氢尿嘧啶方法回收率为95.0%～98.3%.尿嘧啶日内RSD小于6.5%,日阍RSD小于11.7%,二氢尿嘧啶目内RSD小于9.2%,日间RSD小于12.4%.结论:本方法可用于内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的常规监测.

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