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色谱柱：Diamonsil C18 250 mm× 4.6 mm, 5μm(Cat#:99903)
流动相: 乙腈-水, 85%磷酸调节pH为2.4 梯度程序: 0~ 3 min 为24%乙腈, 3~15 min 为80%乙腈
流速: 1.0 mL/min
进样量: 10 μL
检测器: UV 495 nm
| 摘要：目的:利用GX液相色谱法测定叶酸-青霉素G酰化酶(PGA)对N-苯乙酰化阿霉素(DOXP)的催化活性,为叶酸导向的酶催化前体药物的肿瘤ZL(FDEPT)研究奠定理论基础。方法:色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,用85%磷酸调节pH至2.4;梯度程序:0~3 min为24%乙腈,3~15min为80%乙腈;紫外检测波长:495 nm;流速:1 mL/min。结果:DOXP和酶解产物阿霉素的tR分别为5.5 min和12.3 min,原酶PGA和叶酸-PGA偶联酶对DOXP的Km和vmax分别为15μmol/mL,0.094μmol/(min.mg)和19μmol/mL,0.086μmol/(min.mg)。结论:DOXP为PGA的较好底物,叶酸与PGA偶联对酶的催化活性的影响较小。 |
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全文下载：HPLC测定叶酸-青霉素G酰化酶对N-苯乙酰化阿霉素的催化活性 |
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