血浆中维生素A 和维生素E 的测定

1、血液处理 制备3 - 5 mL 血浆，移取2 mL，加入1 mL 20% 氯化钠水溶液，混匀，待净化。

2、硅藻土柱净化

a 上样： 将样品加入ProElut LLE+ 3 mL* (Cat.#62503)，样品在重力的作用下渗入填料；

b 平衡： 静置10 min，使样品在硅藻土表面充分浸润；

c 洗脱： 向柱中加入15 mL ，打开控制阀，调节流速使洗脱液成滴流下，接收洗脱液；

d 重新溶解：25 oC 下将洗脱液减压蒸馏至干，用1 mL 甲醇溶解残渣。将溶解液在-18 oC 下放置3 h，用微孔滤膜过滤后，HPLC 分析

注： “3 mL” 是指硅藻土柱的Zda上样量，如果样品量超过这一数值，样品会流出小柱；添加样品量应尽量接近Zda上样量，否则会有部分洗脱液被扣留，影响回收率；样品量一定时，应选择Zda上样量稍大于样品量的小柱，差值用20% 氯化钠水溶液补足。

色谱柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)

流动相：甲醇/ 水=98/2

流速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

柱温：35oC

检测器：UV 300 nm

适用于血浆中维生素A 和维生素E 的检测。

1. 维生素A；2. a- 维生素E