大鼠促卵泡激素（FSH）elisa试剂盒说明书

实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠促卵泡激素（FSH）水平用纯化的大鼠促卵泡激素（FSH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡激素（FSH），再与HRP标记的促卵泡激素（FSH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色颜色的深浅和样品中的促卵泡激素（FSH）呈正相关用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠促卵泡激素（FSH）浓度 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（48 IU/L） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个1.5 IU/L 1号标准品 150l的2号标准品加入150l标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）标准孔待测样品孔在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀 3. 温育：用封板膜封板后置37温育30分钟 4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外 7. 温育：操作同3 8. 洗涤：操作同5 9. 显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37避光显色15分钟. 10. 终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色） 11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值） 测定应在加终止液后15分钟以内进行