样本的复杂程度和蛋白质浓度的大跨度动态范围一直是蛋白质组学研究面临的最大挑战,如何减少蛋白样品的复杂程度,降低动态范围,进而增加下一步分析的灵敏度和分辨率就成为蛋白质组学流程中样品前处理的最重要步骤。
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样本的复杂程度和蛋白质浓度的大跨度动态范围一直是蛋白质组学研究面临的最 大挑战,如何减少蛋白样品的复杂程度,降低动态范围,进而增加下一步分析的灵敏度和分辨率就成为蛋白质组学流程中样品前处理的最重要步骤。
比如在血液中,蛋白质的丰度差异巨大,跨度可达 12 个数量级,其中高丰度蛋白如白蛋白、免疫球蛋白 IgG 和 IgA、纤维蛋白原、转铁蛋白等占比极高,可达 97-99%。然而,质谱技术在检测中存在倾向性,更易识别相对丰度较高的蛋白质信号,这使得低丰度蛋白——往往是疾病特异性标志物——的检测变得困难。为了提升对这些关键低丰度蛋白的检测能力,研究者们正致力于开发预处理技术,以降低高丰度蛋白的影响,从而揭示那些在疾病诊断和治 疗中具有重要意义的低丰度生物标志物。这一策略对于提高疾病诊断的准确性和深度具有重大意义。
安捷伦 MARS 多重亲和去除系统,可用于鉴定和表征血清、血浆和其它生理体液中发现的高价值、低丰度蛋白和生物标志物。 Mars 多重亲和去除系统可重复而特异性地去除人生理体液中的 14、7 或 6 种高丰度蛋白,以及鼠生理体液中的 3 种高丰度蛋白 (详细见如下列表)。
多重亲和去除系统选择指南
Agilent MARS 多重亲和去除系统的优点
高通量处理能力和灵敏度
可一次性去除 14 种、7 种、6 种、2 种或 1 种高丰度蛋白质,多达蛋白总量的 94%-99%。从而将检出蛋白标志物的灵敏度提高至 ng/ml 水平。
高容效性和特异性
特异性抗体与层析介质的空间靶向性共价结合以及优化的结合洗脱体系保证了最 大限度的结合能力与特定高丰度蛋白的去除。
高重现性和利用率
可利用率高,多达 200 次以上的高效重复使用,大大节省单次实验的成本。
多选择性
产品规格灵活,适合不同实验室的需求,可提供 HPLC 色谱柱和离心小柱 2 种形式和多种规格。
强兼容性
与大多数液相色谱仪器(色谱柱)或台式离心机(离心小柱)完全兼容、实现无缝衔接式分析,或者分离样品可以直接用于 2D、LC/MS 或其它分析技术的下一步分析。
图示结果为同一色谱柱 1、100、150、200 次的分离去除效果的叠加比对结果,说明 MARS 色谱柱的分离去除的高重现性和利用率
为了保证液相色谱柱和离心小柱的最 佳表现,安捷伦提供了使用 Mars 多重亲和去除系统液相色谱柱所需要的所有消耗品和附件,以保证色谱柱寿命和样品重复性最 大化的优化条件。
该试剂盒为 4.6 x 50 mm 液相色谱柱处理约 200 份样品,用 4.6 x 100 mm LC 柱处理约 100 份样品,和 200 个离心小柱所用的缓冲液 A 和缓冲液 B。
特殊配方的缓冲液 A 和上样缓冲液可最 大限度地减少蛋白质之间的相互作用,以避免由于低丰度蛋白与高丰度蛋白的结合而导致的不必要的流失。
特殊配方的缓冲液 B,洗脱缓冲液用来破坏抗体-蛋白之间的相互作用,便于将高丰度蛋白从柱子上洗脱下来,从而提高色谱柱的使用效率。
MARS 多重亲和去除系统配套附件与试剂盒
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