近年来,适配体、向导 RNA、小干扰 RNA、反义寡核苷酸等合成寡核苷酸已成为生命科学和诊断研究的关注焦点,其中许多寡核苷酸在病毒感染、癌症治疗和其他多种治疗应用中表现出潜力。
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近年来,适配体、向导 RNA、小干扰 RNA、反义寡核苷酸等合成寡核苷酸已成为生命科学和诊断研究的关注焦点,其中许多寡核苷酸在病毒感染、癌症治疗和其他多种治疗应用中表现出潜力。但必须对合成工艺和降解过程所产生的杂质加以监测、鉴定和去除。目前,开发和生产核酸类治疗药物面临的关键挑战是需要建立能够分离和鉴定杂质的分析方法,以及可获得高质量和高目标序列产率的纯化方法。
AdvanceBio:寡核苷酸分析与纯化创新解决方案
从分析级到半制备级和制备级应用,Agilent AdvanceBio 寡核苷酸色谱柱、软件和仪器都可以无缝配合,大幅减少方法优化和停机时间。无论您使用的是 LC/MS 还是 UV 分析,AdvanceBio 寡核苷酸系列可扩展的色谱柱填料以及配套的仪器和软件平台都可以推进您的寡核苷酸分析工作流程,实现更出色的表征和纯化。

从半制备到制备:轻松满足各种纯化需求
AdvanceBio 10mm 内径半制备柱(2.7/4μm 粒径),搭配分析型液相色谱仪即可完成半制备纯化与馏分分析,其柱加热功能还能提升分离度与回收率。

图 1. 半制备柱上进样 160 µL(柱上进样 3.2 mg)获得的色谱图(UV 260 nm)。紫色条表示 0.2 分钟时间片段的馏分收集

图 2. 馏分收集器中收集的 6 种馏分的再分析叠加色谱图(UV 260 nm)。表格(插图)显示主峰的纯度和产量
AdvanceBio 寡核苷酸 21.2mm 制备柱与分析柱,无需繁琐方法转移,且用相同固定相做分析表征;其新型 4μm 填料(同系列键合相),能平衡载样量与分离度。

图 3. 使用 DBA/TRIS 和聚焦梯度对短 ON 进行制备型纯化运行。绿色条代表馏分收集的时间片段
安捷伦制备型液相色谱放大计算器
如需了解此计算器如何提供帮助,请单击链接:放大计算器

寡核苷酸纯化解决方案
AdvanceBio 寡核苷酸柱以 4μm 核-壳填料(优于传统 5μm 全多孔填料)解决分离效率低问题;安捷伦独特填料修饰耐高 pH 且键合封端 C18 固定相,可以在高 pH 与温度条件下保障寡核苷酸分析;同时还提供 2.7μm、4μm 粒径应对方法放大难,适配各类分析与制备需求。

图 4. 寡核苷酸纯化工作流程

图 5. 在不同规模下运行的安捷伦系统的分析物数量和流速比较
其他制备纯化填料/ 色谱柱选择
Agilent PLRP-S 色谱柱
反相填料 – 用于离子对反相模式
五种孔径:100Å、200Å、300Å、1000Å 和 4000Å
填料粒径范围从 3µm 到 50µm
Agilent PL-SAX 色谱柱
出众的聚合物阴离子交换填料
两种孔径:1000Å 和 4000Å
填料粒径范围从 5µm 到 30µm
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标签:安捷伦
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