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乙脑病毒鼠源单链抗体的构建及表达

上海希美化学有限公司更新于：2012-09-19

应用行业：食品/饮料/烟草糖果/巧克力及制品

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获得乙脑病毒（JEV）鼠源单链抗体基因（ScFv）并使其在E.coli中表达方法利用噬菌体表面呈现技术，从抗乙脑病毒杂交瘤细胞2H4中构建噬菌体抗体库，采用双抗体夹心模式对抗体库进行富集及检测并将所获得的阳性克隆基因插入GST融合表达载体中，构建融合表达克隆，使其在E.coli中获得稳定表达产物结果所构建的噬菌体抗体库经3轮的吸附洗脱及再感染的富集过程后，共检测到7株稳定的具有乙脑抗原结合活性的阳性克隆，对其中的mu2H4-3和mu2H4-36进行了序列测定经分析，2个克隆的基因序列一致，其重链及轻链分别属于Kabat鼠抗体基因家族中第及第亚群构建为融合表达载体pG51-mu2H4后，此单链抗体mu2H4在E.coli BL21中获得表达，产量约为菌体蛋白的10%结论从抗乙脑病毒杂交瘤细胞中克隆并表达了特异单链抗体片段mu2H4，为下一步的人源化改造提供了资料

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