2025-01-10 17:02:33动力学显色检测法
动力学显色检测法是一种基于化学反应速率与显色程度关系的分析方法。它利用待测物质参与特定化学反应时,反应速率与显色程度随时间变化的特性进行定量或定性分析。该方法广泛应用于环境监测、食品安全、生物医药等领域,具有灵敏度高、选择性好及操作简便的技术优势。通过动力学显色检测法,可实现痕量物质的快速检测,为化学分析提供了有力手段。

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2022-12-04 19:40:01高内涵应用案例——线粒体动力学检测和表型分析
引言新陈代谢是生物体内进行的化学变化的总称,是生物最基本的生命活动过程。细胞从环境汲取能量、物质,在内部进行各种化学变化,维持自身高度复杂的有序结构,保证生命活动的正常进行。作为细胞的“能量工厂”,线粒体在维持能量稳态方面发挥重要作用,可以调控蛋白质、脂质、溶质和代谢物产物的进出,并保护细胞质免受有害线粒体产物的影响。线粒体通过不断的分裂和融合,维持线粒体形态、分布和数量,维持细胞稳态,该过程被称为线粒体动力学。线粒体自噬是机体清除细胞内功能异常的线粒体的过程,是线粒体质量控制的主要机制。线粒体动力学的病理改变可导致生物能量功能受损和线粒体介导的细胞死亡,并与多种病理机制相关,包括缺血性心肌病,糖尿病,肺动脉高压,帕金森氏病,亨廷顿氏病,骨骼肌萎缩症、阿尔茨海默病等。线粒体大小和形状取决于它们在细胞内的位置以及不同细胞对能量的需求。当线粒体发生损伤时,它的形态和完整性会发生改变,如线粒体的数量、大小、长度和形状等。线粒体形态、结构和功能的检测对于了解线粒体的稳态以及功能状态有重要意义。高内涵成像分析系统非常适合进行线粒体表型和结构的研究。共聚焦成像和水镜可以提高成像质量并更好地显示线粒体结构,高内涵的图像分析工具可以帮助科研工作者获得不同表型的数字特征,线粒体表型和结构重排的分析模块可用于线粒体动力学为基础的细胞研究。 结果展示使用不同浓度的化合物,包括氯喹(抑 制线粒体循环),鱼藤酮(氧化磷酸化抑 制剂)和缬氨霉素(钾离子载体)处理 PC12(人神经母细胞瘤细胞)。将活细胞用线粒体染料 MitoTracker Orange  和 Hoechst 进行染色,利用 ImageXpress Micro Confocal 系统(Molecular Devices)进行成像,使用共聚焦模式和 40X 水镜拍摄活细胞的图像,分辨单个线粒体并检测线粒体形态变化。使用 MetaXpress 高内涵图像采集和分析软件中的 Custom Module Editor(自定义模块编辑器)分析图像,使用“Granularity”模块和“Find Fibers”模块识别圆形颗粒和细长的线粒体(图 1)。图 1 .线粒体形状的表型分析。Molecular Devices 高内涵成像分析系统适用于各种细胞模型中化合物的药物开发或毒性评估。不同化合物处理会导致线粒体形态变化,膜电位的损失、以及细胞的程序性死亡等。MetaXpress 软件非常适合进行线粒体形态的测定,可以定义每个对象的数量、面积、强度、长度和形状(表1,2)。使用具有共聚焦模式的 40X 水镜对细胞进行成像,MetaXpress 自定义模块编辑器分析图像(图 2)。这些检测结果可以计算剂量反应和各种化合物的有效浓度,以及用数字来表征线粒体结构动力学(图 3)。图 2 .化合物对线粒体的作用。使用MitoTracker Orange对线粒体进行染色( 黄色 ),对照组(A)、缬霉素(B)、鱼藤酮(C)。使用特定浓度的化合物(氯喹,鱼藤酮和缬氨霉素)处理 PC12 细胞,对细胞进行染色和成像。通过图像分析将线粒体结构确定为“纤维”(顶部)或“颗粒”(中部),底部为线粒体染色后荧光强度的变化。EC50的值取决于四个浓度依赖性复本和参数曲线的拟合(图 3)。图 3 .使用氯喹(绿色),鱼藤酮(红色)和缬氨霉素(蓝色)处理 PC12 细胞。EC50的值取决于四个浓度依赖性复本和参数曲线的拟合。在分析过程中,我们比较了水镜和空气镜对图像质量和分析的影响。结果显示,使用水镜可以提高图像质量,并且通常会导致 Z' 值增加( 表 3 )。图 4 显示了使用自定义模块编辑对线粒体表型进行计数和分析,以评估线粒体的健康、代谢、循环、复合效应和疾病状态等。并且,自定义模块编辑可以针对特定的细胞类型或疾病模型进行进一步的调整和修改。表 1 .用图 3 所示的曲线定量 EC50。表 2 .不同的对照和化合物处理方法的比较。上面四列数据分别是对照,10 um 的氯喹,300 nm 的鱼藤酮,和 10 nm 的缬氨酸霉素。表 3 .与空气镜相比,水镜可以提高图像质量,获得更高的Z’值。 图 4 .自定义模块编辑器(CME)。 总结Molecular Devices 高内涵成像分析系统适用于各种细胞模型中化合物的药物开发或毒性评估。使用高内涵成像和高级图像分析的线粒体动力学分析方法不仅可以量化线粒体的表型变化,而且这种多参数方法也可用于研究正常和病理结构变化以表征疾病模型或复合效应。 主要特点 获得高质量的图像,更好地显示线粒体形状和结构的变化以更有效、更精确的方式量化和测量线粒体的表型变化了解疾病的机制并评估各种细胞模型中的化合物毒性参考文献:[1]. Gottlieb RA, Bernstein D. Mitochondrial remodeling: Rearranging, recycling, and reprogramming. Cell Calcium, 2016, 60(2): 88–101.[2]. Yoon Y, Krueger EW , Oswald BJ , et al. The Mitochondrial Protein hFis1 Regulates Mitochondrial Fission in Mammalian Cells through an Interaction with the Dynamin-Like Protein DLP1. Molecular & Cellular Biology, 2003, 23(15):5409-5420.[3]. McLelland GL, Soubannier V, Chen CX, et al. Parkin and PINK1 function in a vesicular trafficking pathway regulating mitochondrial quality control. Embo Journal. 2014, 33(4):282-295.[4]. Twig G, Elorza A, Molina AJ, et al. Fission and selective fusion govern mitochondrial segregation and elimination by autophagy. Embo Journal. 2008, 27:433–446.[5]. Longo DL , Archer SL . Mitochondrial dynamics--mitochondrial fission and fusion in human diseases. New England Journal of Medicine, 2013, 369(23):2236-2251.[6]. Qi X, Disatnik MH, Shen N, et al. Aberrant mitochondrial fission in neurons induced by protein kinase C{delta} under oxidative stress conditions in vivo. Molecular biology of the cell. 2011, 22(2):256–265.[7]. Yu T, Sheu SS, Robotham JL, Yoon Y. Mitochondrial fission mediates high glucose-induced cell death through elevated production of reactive oxygen species. Cardiovascular Research. 2008, 79:341–351.[8]. Ong SB, Subrayan S, Lim SY, et al. Inhibiting Mitochondrial Fission Protects the Heart Against Ischemia/Reperfusion Injury. Circulation, 121(18), 2012-2022.[9]. Suen DF, Norris KL, Youle RJ. Mitochondrial dynamics and apoptosis. Genes Dev. 2008, 22:1577-590.[10]. Konopka AR, Suer MK, Wolff CA, et al. Markers of Human Skeletal Muscle Mitochondrial Biogenesis and Quality Control: Effects of Age and Aerobic Exercise Training. The Journals of Gerontology. 2014, 69(4):371-378.
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2023-06-09 18:08:32生物柴油含量检测-时域核磁法
为什么要检测生物柴油含量?生物柴油是一种由植物油、动物油、废弃物油脂等生物质材料经过酯化、脱水等化学反应制成的油品,其化学成分和石油柴油基本相同,但具有更高的氧含量和较低的排放,是一种可再生的清洁能源。通过将柴油与生物柴油混合,可以减少柴油排放,有关立法已经完成,要求在石油柴油与生物柴油混合物中引入最-低水平的生物柴油。因此,有必要制定出标准的试验方法来测定柴油-生物柴油混合物中的生物柴油含量,以便实施此类立法。生物柴油含量检测-时域核磁法时域核磁的弛豫行为(弛豫时间、信号幅度、峰面积)和样品中分子的运动性及质子含量有关。柴油主要由长链烷烃组成,生物柴油中含有甲基亚油酸甘油酯等大量的不饱和脂肪酸甘油酯,两者分子运动性有着明显差异,信号幅度/峰面积和分子量呈正相关,利用此特性可区分柴油、生物柴油并定量混合柴油中生物柴油含量。                     生物柴油含量与信号幅度关系曲线时域核磁法检测生物柴油含量的优势1、虽然样品需要恒温处理,但核磁法测量时间短(通常几十秒),测试过程简单;2、仪器操作简单,简单需培训即可使用仪器;3、核磁共振技术是无损检测技术,可对同一样品进行重复测量或进行其他测量;4、核磁法校准方便,仪器稳定可靠;5、可现场、可在线测量;核磁共振分析仪PQ001-GU
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2022-02-09 15:38:29低场核磁共振法用于聚合物的分子动力学研究-交联密度、老化过程
低场核磁共振法用于聚合物的分子动力学研究-交联密度、老化过程、填充剂在工业生产过程中和研究型实验室里需要有一种快速、有效、简单实用的方法来评价交联密度。低场核磁法非常适合在生产领域中对交联密度变化点检测,核磁法简单易用,可以作为聚合物生产过程中质量控制的工具。同时低场核磁对聚合物的分子动力学非常敏感,可以用于多尺度的分子动力学研究,为聚合物改性、配方、老化、性能评价提供可靠数据,是一款科研利器。低场核磁法的主要检测对象是氢核(1H),由于聚合物中不同链段上的H所处的周围环境不一致,H的自旋磁矩(核自旋)存在差异。施加射频脉冲后,自旋系统在恢复热平衡状态的过程中表现出来的弛豫行为不同,通过弛豫时间的差异可以体系聚合物的分子动力学信息。而分子分子动力学信息直接与聚合物的交联密度、老化、填充剂相关。分子内和分子间氢质子的偶极相互作用产生核磁共振的横向弛豫。当温度远远高于聚合物的玻璃态温度时,聚合物网络中的这种偶极相互作用被认为是热分子运动的平均。由于聚合物单链中的氢质子被作为核磁共振测量的探针,于是一种修正的单链模型被引入并用来解释聚合物的横向弛豫。低场核磁共振法可用于研究:1、活化能的测定;2、天然橡胶交联密度测试;3、硫含量对橡胶交联的影响;4、促进剂种类和用量对橡胶交联的影响5、氧化锌和硬脂酸含量对橡胶交联的影响6、橡胶硫化过程中对应的磁共振模型参数的演化7、混炼时间对磁共振模型参数的影响8、纳米黏土含量对橡胶交联的影响变温核磁共振分析仪
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2024-01-17 16:05:50免疫层析法和胶体金法的区别
免疫层析法和胶体金法是两种常用的生物检测技术,它们在原理、应用和优缺点等方面存在显著差异。 ①原理区别:免疫层析法是一种基于抗原-抗体反应的生物检测技术,利用标记有荧光物质、酶、胶体金等物质的抗体或抗原,检测样品中是否存在相应的抗原或抗体。当样品中的抗原与标记的抗体结合后,可以通过层析作用将结合物分离并检测。而胶体金法则是利用胶体金作为标记物,通过免疫学方法检测样品中的生物分子。胶体金是一种由氯金酸水溶液在还原剂作用下形成的金颗粒,这些金颗粒分散在溶液中形成胶体溶液。当生物分子与胶体金结合后,可以通过显色反应判断是否存在该生物分子。 ②应用区别:免疫层析法主要应用于医学诊断、食品安全、环境监测等领域。例如,用于检测尿液、血液、组织液等生物样品中的病毒、细菌、蛋白质等物质。胶体金法则主要应用于免疫分析、生物传感器等领域。由于胶体金法操作简便、灵敏度高、特异性好等特点,被广泛应用于临床诊断、生物制品质量控制等方面。 ③优缺点区别:免疫层析法和胶体金法在优缺点方面也存在差异。免疫层析法的优点在于其高特异性、高灵敏度、高重复性等特点,能够快速准确地检测出样品中的目标物质。但是免疫层析法的操作较为繁琐,需要经过多个步骤才能完成检测,而且成本较高。胶体金法的优点在于其操作简便、快速、无需特殊设备等特点,能够在短时间内完成大量样品的检测。但是胶体金法的缺点在于其灵敏度相对较低,对于低浓度目标物质的检测可能会出现假阳性或假阴性的情况。 总的来说,免疫层析法和胶体金法各有其优缺点,具体应用应根据实际情况选择。在某些情况下,可以将两种方法结合使用,以获得更好的检测效果。例如,在检测病毒抗原时,可以先使用免疫层析法进行初筛,然后再用胶体金法进行确认,以提高检测的准确性和特异性。 总之,免疫层析法和胶体金法是两种常用的生物检测技术,它们在原理、应用和优缺点等方面存在显著差异。在实际应用中,应根据具体情况选择合适的方法,以达到最-佳的检测效果。同时,随着技术的不断发展,相信这两种方法将会在未来的生物检测领域发挥更加重要的作用。蛋白层析纯化详情:https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/chromatography-purification义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索“义翘神州”与我们取得联系。 
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2023-06-29 13:48:02热气流固结纤维网串珠结构可控性 及其结晶动力学
HS-DSC-101差示扫描量热仪是一种测量参比端与样品端的热流差与温度参数关系的热分析仪器,主要应用于测量物质加热或冷却过程中的各种特征参数:玻璃化转变温度Tg、氧化诱导期OIT、熔融温度、结晶温度、比热容及热焓等.热气流固结纤维网串珠结构可控性 及其结晶动力学【1. 东华大学纺织学院 2. 东华大学纺织面料技术教育部重点实验室 3. 东华大学产业用纺织品教育部工程研究中心 周铃;靳向煜】热气流固结纤维网串珠结构可控性 及其结晶动力学热气流固结纤维网串珠结构可控性 及其结晶动力学上海和晟 HS-DSC-101 差示扫描量热仪
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