2025-04-10 15:08:24透射电镜原位
透射电镜原位技术是一种在透射电子显微镜中直接观察材料在特定环境下的动态变化的方法。它允许科学家在原子尺度上实时观察材料的结构演变、化学反应及物理性质的变化。通过该技术,可以深入理解材料的行为机制,为新材料的设计和性能优化提供关键信息。

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2022-12-06 13:04:21探秘肿瘤微环境,原位“看透”细胞因子
细胞因子是肿瘤微环境(Tumor Microenvironment,TME)中细胞通讯的关键介质,在癌症的发生、发展、治 疗和预后等多个方面发挥重要作用。在过去的 40 年中,细胞因子和细胞因子受体作为癌症靶点或癌症治 疗方法得到了广泛的研究。目前公认的临床前治 疗策略为增强干扰素和白细胞介素(包括 IL-2 ,IL-7 ,IL-12 和 IL-15 )的生长抑 制和免疫刺激作用,或抑 制细胞因子(如 TNF ,IL-1β 和 IL-6 )的炎症和促进肿瘤的作用[1]。图 1 . 细胞因子在肿瘤微环境中的作用特定细胞因子的表达也与肿瘤细胞的高存活率和高转移性密切相关。其中促炎细胞因子 IL-6 和 IL-8 与多种癌症相关,包括淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌和结肠直肠癌等 [2,3]。因此,分析细胞因子的表达是一种重要的诊断工具和预测癌症预后的关键因素。非放射性的 RNA 原位杂交技术(ViewRNA ISH)是一种高灵敏度的检测细胞因子表达的有效方法,并且可以对 1 至 4 个 mRNA 目标进行多重分析。检测原理如下图所示:图 2 .  ViewRNA ISH 检测原理安捷伦BioTek Cytation 5 多功能细胞成像微孔板检测系统,可容纳多达四个荧光通道同时成像,快速并出色地成多色荧光成像。仪器配备的高内涵分析软件可自动计算细胞内 RNA 的表达水平。Cytation 5 活细胞成像工作站结合ViewRNA ISH,为细胞因子研究提供了一种高效率、高灵敏度和可重复的检测方法。实验案例分享 实验一.细胞因子mRNA的成像和分析 为研究细胞因子mRNA 在不同营养条件下的表达情况,设置两组对照实验。阳性对照细胞培养于完全培养基中,而阴性对照细胞经过 18 小时的血清饥饿处理。随后加入 ViewRNA 探针以标记 IL-6 、IL-8 和 ACTB mRNA ,在Cytation 5 上分别使用 RFP 、GFP 、Cy5 和 DAPI 通道对探针进行成像完成 ISH 细胞分析。图像结果表明:细胞因子mRNA 的表达在营养匮乏的条件下会显著降低。图 3 . 阳性和阴性对照组成像。HCT116 放大 20 倍图像作为( A )阳性对照和( B )阴性对照。MDA-MB-231 细胞放大 40 倍的图像作为( C )阳性对照和( D )阴性对照。蓝色:DAPI 染色的细胞核;绿色:标记 IL-8 mRNA ;橙色:标记 IL-6 mRNA ;红色:标记 ACTB mRNA 。接下来为了定量分析细胞因子表达,首先在 Cytation 5 的 DAPI 通道下进行细胞核计数,以确定每孔的细胞数量(图 4A )。然后分别在GFP 、RFP 通道进行细胞因子探针( IL-6 或 IL-8 )的荧光信号分析(图 4B )。通过细胞荧光信号的比率评估不同实验条件下的细胞因子表达(图 5 )。图 4 . 每个细胞的荧光信号分析。( A ) 使用 Agilent-BioTek Gen5 软件进行细胞分析圈选出 DAPI 标记的细胞核;( B ) 荧光标记的 IL-8 信号的图像分析。如图 5 所示,使用 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 这一组合准确的量化了细胞内 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表达。图 5 . MDA-MB-231 细胞中 IL-8 表达和 HCT116 细胞中 IL-6 表达,并以细胞数目进行校正。 实验二.诱导细胞因子 mRNA 的表达 使用不同剂量的 IL-1β 刺激 DU145 细胞,以分析细胞因子的 mRNA 的表达(图6)。图 7 结果显示:虽然 IL-6 和 IL-8 的 mRNA 表达增加,但 IL-8 的表达变化更为显著,这与先前研究结果一致[4]。IL-1β 的最 高剂量下,这两种细胞因子的表达减少则是由于细胞毒性。这验证了该检测方法的可行性与稳定性。图 6 . 不同浓度的 IL-1β 刺激下的 IL-6 、IL-8 和 ACTB 荧光 mRNA 探针信号 ( A ) 0 ng/mL;( B ) 0.02 ng/mL ;0.128 ng/mL;( D ) 0.8 ng/mL。蓝色:DAPI染色的细胞核;绿色:标记的IL-8 mRNA;橙色:标记的 IL-6 mRNA ;红色:标记的 ACTB mRNA 。图 7 . 不同浓度的 IL-1β 刺激下 DU145 细胞中 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表达。 实验三.抑 制细胞因子 mRNA 的表达 研究表明丝裂原活化蛋白激酶( MAPK )可调节 IL-8 ,并证明用 MAPK/ERK 抑 制剂 U 0126 治 疗可减少 DU145 和 MDA-MB-231 细胞中的炎症细胞因子[4,5]。为了确认这一现象并验证 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 这一组合的能力,将不同浓度的 U 0126 加入到每种细胞类型中孵育 30 分钟。然后用 1 ng/mL 的 IL-1β 刺激 DU145 细胞达 3 小时,而 MDA-MB-231 细胞未被刺激。使用 GFP 和 RFP 通道进行细胞计数和图像分析以评估在 U 0126 治 疗后 IL-8 和 IL-6 细胞因子 mRNA 的表达。采集的图像(图 8 )和计算的荧光信号强度 (图 9 )证实了 U 0126 的抑 制作用。此外,也验证了该方法的灵敏度,可以准确识别给予抑 制剂后 mRNA 的表达变化。图 8. U 0126 抑 制 IL-8 mRNA 的表达。图像显示了在不同浓度的 U 0126 处理后 ( A-E ) MDA-MB-231 细胞内 IL-6 、IL-8 和 ACTB 荧光 mRNA 探针信号;( F-J ) 为 DU145 细胞。蓝色:DAPI 染色的细胞核;绿色:标记的 IL-8 mRNA ;橙色:标记的 IL-6 mRNA ;红色:标记的 ACTB mRNA 。图 9 . U 0126 治疗后 IL-8 和 IL-6 mRNA 在 MDA-MB-231 和 DU 145 细胞中的表达结 语ThermoFisher 的 ViewRNA ISH 细胞分析试剂盒和探针提供一种灵敏的方法来检测 mRNA 表达。该方法在安捷伦BioTek Cytation 5 细胞成像系统的加持下得以更更快地采集多荧光通道的图像,并更精 准的计算出每一个细胞的荧光信号强度。这种检测、成像和分析的完 美结合提供了一种灵敏、灵活和高通量的方法用以检测细胞因子 mRNA 的表达。参考文献:[1] Propper DJ, Balkwill FR. Harnessing cytokines and chemokines for cancer therapy. Nat Rev Clin Oncol. 2022 Apr;19(4):237-253.[2] Kampan NC, Xiang SD, McNally OM, Stephens AN, Quinn MA, Plebanski M. Immunotherapeutic Interleukin-6 or Interleukin-6 Receptor Blockade in Cancer: Challenges and Opportunities. Curr Med Chem. 2018;25(36):4785-4806.[3] Vecchi L, Mota STS, Zóia MAP, Martins IC, de Souza JB, Santos TG, Beserra AO, de Andrade VP, Goulart LR, Araújo TG. Interleukin-6 Signaling in Triple Negative Breast Cancer Cells Elicits the Annexin A1/Formyl Peptide Receptor 1 Axis and Affects the Tumor Microenvironment. Cells. 2022 May 20;11(10):1705.[4] Kooijman R, Himpe E, Potikanond S, Coppens A. Regulation of interleukin-8 expression in human prostate cancer cells by insulin-like growth factor-I and inflammatory cytokines. Growth Horm IGF Res. 2007 Oct;17(5):383-91.[5] Chelouche-Lev D, Miller CP, Tellez C, Ruiz M, Bar-Eli M, Price JE. Different signalling pathways regulate VEGF and IL-8 expression in breast cancer: implications for therapy. Eur J Cancer. 2004 Nov;40(16):2509-18. 
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2023-04-12 16:50:58焦耳加热装置-焦耳热加热器-合肥原位科技
合肥原位科技焦耳加热装置,针对导电材料,科学家可利用其自身的焦耳效应,对其施加电气环境;针对非导电材料,则可通过我司配备的各类耐高温极速加热样品台进行加热,从而使材料在极短的时间内(0~10 S)达到极高的温度(1000~3000 ℃),升温速率最快可达到10000k/s。通过对材料的极速升温,可考察材料在极端环境、剧烈热震情况下的物性改变。该产品目前广泛应用在电池、催化、陶瓷、金属材料等领域,可通过极速升降温制备纳米尺度颗粒,单原子催化剂,高熵合金等。装置可定制电气环境及真空系统。配件包含:控制柜、真空腔、电极、真空泵、高温样品台、测温探头、适配线缆。合肥原位科技有限公司已构建原位表征系统解决方案(含测试)、催化剂评价装置及焦耳加热装置三大主营产品体系,可满足众多用户对于多环境原位表征的需求,同时为客户提供原位测试工作。目前已与国内270余家知名高校、科研单位建立了各类联络机制。联系我们,请登录“合肥原位科技有限公司”,欢迎咨询。
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2022-12-04 20:10:14光 气“在线产生原位消耗”——连续光化学反应
欢迎您扫描二维码获取资料研究背景在连续流工艺中,原料化合物在极小的空间内进行快速混合和换热,并在精确控制反应温度、压力的情况下,在极短的时间内完成反应。因此,对于常规下需要小心处理的反应体系,如产生剧烈放热、爆炸风险高的反应(自由基反应,光化学反应等)或使用剧毒化学品的反应,连续流反应系统适用性更高。光 气的连续在线制备光 气(COCl2)是一种非常重要的有机中间体,具有很高的反应活性,但同时毒性极高。本文作者研究了一种新的流动光化学方法,以CHCl3和氧气(O2)在光照下在线制备COCl2,获得96%的收率。这个连续流动反应系统可以合成有价值的氯甲酸酯,碳酸酯和聚碳酸酯。图1. 反应流程及装置图如上图所示,反应器由12个石英玻璃管和一个40 W的低压水银灯作组成,总持液体积12.1ml。氯仿(CHCl3) 通过注射泵注入,氧气(O2)通过质量流量控制器(MFC)输送,两股物料混合时并伴有90℃加热至气态,混合气体进入光化学反应器中(反应器温度50℃),在一定波长下,在线生成光 气,然后进一步与醇类底物进行反应得到目标产物。研究过程一.工艺参数筛选作者以正丁醇为底物筛选出光 气的最 优反应条件,从反应器出口得到的光 气进一步与丁醇反应,得到产物1a和2a,并通过核磁来计算反应收率。筛选条件时,通过控制氯仿和氧气的物料流速来调整反应时间(exposure time)以及反应配比,得到的结果如下图所示。表1.工艺参数筛选实验结果二. 半连续方式进行底物拓展在筛选出最 优的制备光 气条件后,作者尝试不同醇类作为底物,以半连续的方式(光 气采取连续流反应制备,碳酸酯采取釜式搅拌制备)进行碳酸酯的合成,均获得了不错的收率,其中部分底物收率最 高可达98%,结果如下。图2. 半连续反应流程图三. 全连续方式制备碳酸酯作者进一步将整个系统构建为全连续化,在有/无溶剂,有/无有机碱以及不同有机碱的体系下拓展了反应底物,结果如下。表2.全连续制备碳酸脂结果可以看出,将整个系统整合成全连续过程,可以达到较好的收率。全连续化的实现也能大大增加化学反应的可靠性,稳定性和安全性。总结通过连续流光化学反应器在线制备光 气是可行的;结合半连续和全连续反应系统,能成功地完成各类碳酸酯和氯甲酸酯的合成。参考文献:Org. Process Res. Dev,November 11, 2022
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2021-07-21 11:42:09原位生物发酵颗粒分析系统
北京海菲尔格科技有限公司作为德国SEQUIP公司全权代理,为您提供更优质的服务和体验。                      此外,北京海菲尔格科技有限公司还代理芬兰PIXACT 结晶监测系统、在线颗粒度、在线粒度仪、在线粒度测定仪、在线颗粒成像分析仪,在线颗粒成像,在线颗粒显微镜,在线颗粒录影显微镜、在线气泡监测  、在线液滴监测;美国remspec在线红外(反应红外)、在线反应红外光谱仪、在线红外分析仪;德国TEWS在线水分(便携式微波水分测定仪、实验室用微波水分测定仪、在线微波水分测定仪)水分仪,水份测定仪,在线水分仪,在线水份测量仪,微波水分仪;德国HITEC ZANG反应量热、量热仪、全自动合成反应器、全自动反应釜、平行反应釜、平行反应器;德国Hentschel便携式摩擦系数测定仪,摩擦系数测定仪等产品。现在给大家详细介绍一下:原位在线生物发酵颗粒分析系统SEQUIP的BCATM在线原位生物发酵颗粒分析系统,可以为发酵过程提供实时在线监测,可以实时监测细胞数量、细胞生长速度、以及颗粒分布等。SEQUIP的BCATM传感器适用于5mL直至任何放大规格的发酵罐和反应釜。SNAP技术可以实现同时多点实时监测、便捷拆卸和清洗,满足制药和化工行业的应用标准。  德国SEQUIP(SEQUIP S+E GMBH)总部位于德国杜塞尔多夫,具有20多年的历史,集研发、生产和测试技术为一体的在线颗粒分析测试方案的供应商,致力于为企业提供高品质的在线颗粒分析解决方案。德国SEQUIP始终以的标准进行产品设计和生产,持续改进产品质量,拓展终端应用,引领在线颗粒分析的前沿,是该应用领域的技术者,能够满足客户日趋复杂和特殊的应用需求。
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2022-11-28 16:56:21原位变温低场核磁共振系统用于抗冻蛋白分子动力学分析
原位变温低场核磁共振系统用于抗冻蛋白分子动力学分析什么是抗冻蛋白?抗冻蛋白是一种能抑zhi冰晶生长的蛋白质或糖蛋白质.自二十世纪发现以来,研究对象先后从极区鱼类,昆虫,转移到植物材料上。抗冻蛋白是生活在寒冷区域的生物经过长期自然选择进化产生的一类用于防止生物体内结冰而导致生物体死亡的功能性蛋白质。对于抗冻蛋白抗冻机制的研究有助于揭开冰晶成核、生长和冰晶形貌调控的分子层面的机理。抗冻蛋白生长机制的模型抗冻蛋白吸附在冰晶表面,通过EAFC3效应抑zhi其生长.机制的模型为:一般晶体的生长垂直于晶体的表面,假如杂质分子吸附于冰生长通途的表面,那么需要在外加一推动力(冰点下降),促使冰在杂质间生长.由于曲率增大,使边缘的表面积也增加.因表面张力的影响,增加表面积将使体系的平衡状态发生改变,从而冰点降低。通过对抗冻植物抗冻活性的研究,认为抗冻植物形成了一种特殊的控制胞外冰晶形成的机制,即抗冻蛋白和冰核聚物质的协同作用.在植物体内,热滞效应并不明显,而冰重结晶抑zhi效应显著.吸附抑zhi学说是否适应于植物有待于进一步的证实.原位变温低场核磁共振系统用于抗冻蛋白分子动力学分析原位变温低场核磁共振系统是指可以实现在线原位改变样品温度,并在设置温度下对样品进行原位测量的低场核磁共振系统。该系统可同时实现弛豫分析和磁共振成像功能。传统的低场核磁共振系统是常温测试系统,测试过程中样品的温度保持与实验室温度(环境温度)一致,检测到的数据与样品在室温下的特性相关。而原位变温低场核磁共振系统可对样品进行程序控温(高低温),并进行原位检测,可研究不同温度下样品的特性。可对样品进行冷冻过程、干燥过程、蒸煮过程、样品冰点、食品变性过程等相关研究。 原位变温低场核磁共振系统是在常规低场核磁共振系统上加配了变温探头、控温硬件以及控温软件。系统样机如下图:
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