- 2025-01-10 10:53:44微流控液滴合成
- 微流控液滴合成是一种在微流控芯片上实现液滴生成、操控及合成的技术。它利用微通道中的流体动力学效应,精确控制液滴的大小、形状和组成。该技术能够在微小空间内实现高效的化学反应、物质分离和细胞培养等过程,具有高通量、低消耗和高度可控性等优点。微流控液滴合成在药物筛选、材料合成、生物分析等领域展现出巨大潜力,是微流控技术的重要应用方向之一。
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微流控液滴合成问答
- 2023-08-14 11:23:11用于片上生物工厂的基于液滴微流控的集成分散相显微镜
- 2% surfactants表面活性剂FluoSurfIn the droplet generation unit, highly monodisperse droplets encapsulating H. lacustris cells are generated on demand. The buffer with suspended H. lacustris cells and biocompatible fluorescence oil (HFE-7500) with 2% surfactants (FluoSurf, Emulseo) are employed as the dispersed phase and the continuous phase, respectively.用于片上生物工厂的基于液滴微流控的集成分散相显微镜在代谢工程中,对单细胞胞内结构的生物分子成像以及随后的细胞筛选有很高的要求,以开发具有所需表型的菌株。 然而,当前方法的能力仅限于群体规模的细胞表型鉴定。 为了应对这一挑战,我们建议利用分散相显微镜与基于液滴的微流体系统相结合,该系统结合了液滴按需生成、生物分子成像和液滴按需分选,以实现细胞的高通量筛选 已识别的表型。 特别是,细胞被封装在形成微流体液滴的均质环境中,并且可以研究生物分子诱导的分散相以指示单个细胞中特定代谢物的生物量。 因此,检索到的生物量信息引导片上液滴分选单元筛选具有所需表型的细胞。 为了证明概念,我们通过促进湖红球藻菌株向高产天然抗氧化剂虾青素的进化来展示该方法。 所提出的系统具有片上单细胞成像和液滴操作功能的验证揭示了高通量单细胞表型分析和选择潜力,适用于许多其他生物工厂场景,例如生物燃料生产、细胞治疗中的关键质量属性控制等。本内容节选自下面文献:Yingdong Luo, Yuanyuan Huang, Yani Li, Xiudong Duan, Yongguang Jiang, Cong Wang, Jiakun Fang,* Lei Xi,* Nam-Trung Nguyen and Chaolong Song, Dispersive phase microscopy incorporated with droplet-based microfluidics for biofactory-on-a-chip, Lab Chip, 2023,23, 2766-2777. DOI: 10.1039/D3LC00127J
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- 2023-07-01 17:12:43微液滴数字PCR(ddPCR)油相7500试剂
- 数字PCR可以直接计算目标序列的拷贝数,因此无需依赖于对照样品和标准曲线就可以进行精确的绝对定量检测;此外,由于数字PCR在进行结果判读时仅判断有/无两种扩增状态,因此也不需要检测荧光信号与设定阈值线的交点,完全不依赖于Ct值的鉴定,因此数字PCR的反应受扩增效率的影响大大降低,对PCR反应抑制物的耐受能力大大提高;数字PCR实验中标准反应体系分配的过程可以极大程度上降低与目标序列有竞争性作用的背景序列浓度,因此数字PCR技术也特别适合在复杂背景中检测稀有突变。微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR, DDPCR)是第三代 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)技术,是一种对核酸分子进行绝对定量的方法。DDPCR的原理是在PCR扩增前对样品进行微滴化处理,即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴,其中每个微滴或不含待检核酸靶分子,或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后,逐个对每个微滴进行检测,有荧光信号的微滴判读为1,没有荧光信号的微滴判读为0,根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。在ddPCR中的微液滴产生中,ddPCR-DG7500油相可以直接和PCR扩增试剂(包含待测的DNA样品)注入到液滴合成芯片中,产生所需要尺寸的乳液滴微球。随后,将获得的乳液滴微球进行PCR扩增。ddPCR-DG7500油相是一种包含PFPE-PEG混合结构的HFE7500油相溶液,可以直接用于ddPCR中的乳液微球产生,无需再进行二次处理。该油相可以帮助用户节省实验时间,获得良好的实验结果,同时把精力用于目标产物上,不用担心因油相质量不稳定而产生的不良目标产物。ddPCR-DG7500油相试剂是一种液体状态,提供1mL包装和2mL包装的两种规格。名称:数字PCR油相7500试剂型号:ddPCR-DG7500规格:液体状态,4℃环境保存,体积:1mL,EP管包装,即开即用。
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- 2023-06-14 13:08:58基于纳米微滴的试剂注入到油包水液滴中
- FluoSurf (2%, w/w) in HFE 7500 含氟表面活性剂 Zhu B, Du Z, Dai Y, Kitguchi T, Behrens S, Seelig B. Nanodroplet-based reagent delivery into water-in-fluorinated-oil droplets. ChemRxiv. Cambridge: Cambridge Open Engage; 2023; 体外区隔化是一种生成油包水微滴的技术,用于建立基因型(DNA信息)-表型(生物分子功能)连锁,这是许多生物学应用所需要的。近年来,由于氟化油具有较好的生物相容性,在微滴制造中得到了越来越广泛的应用。然而,需要在含氟水的油微滴中添加试剂来进行多步反应是困难的。芯片上的微滴操作通常用于此目的,但它可能遇到一些技术问题,即低通量或将试剂递送到不同的微滴中有时间延迟。因此,我们评估了采用基于纳米液滴的方法使用铜离子和中等大小的肽(2 kDa)分子来解决这些问题的可行性。
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- 2023-07-16 14:42:17利用光学吸光度在kHz速率下对微流体液滴进行声学分选
- 采用HFE Novec 7500 (3m,美国)含1.8% FluoSurf表面活性剂(Emulseo,法国)的氟化油为连续相,水溶液为分散相形成液滴。表面活性剂用于稳定液滴界面,防止液滴在重新注入芯片时破裂或合并。液滴微流控技术使人们能够满足日益增长的筛选大型生物样本库的需求。吸光度光谱通过无标签目标识别补充了荧光检测的黄金标准,并提供了更多的可量化数据。然而,这受到速度和灵敏度的限制。在本文中,我们通过加入声流体来提高分选速度,实现了1 kHz的目标液滴分选率。我们改进了微流控PDMS光聚焦准直装置的吸光度检测装置设计,利用集成透镜对样品进行基于纤维的问询。这种光学改进减少了散射和折射伪影,提高了信号质量和灵敏度。这种新颖的设计使我们能够克服基于介电分选的限制,例如液滴大小依赖性,样品的材料和介电性质。我们的声波激活吸收分选机消除了对偏移染料或匹配油的需求,并且比当前的吸收分选机更快地进行分类。
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- 2023-05-21 09:21:54重复测试FluoSurf表面活性剂在COC芯片中产生微液滴小球
- 目标:针对客户反馈的工业显微镜相机拍摄的液滴产生照片中FluoSurf表面活性剂无法产生液滴小球而进行复现测试测试条件:1)高精密压力流量控制器OB1 MK4(量程范围:0到2000mbar),以快速、无脉冲的压力形式驱动液体流动;2)科式流量计BFS1+,用于监测和控制油相液体的流速;3)数字流量传感器MFS2,用于监测和控制多相水相液体的流速;4)COC液滴芯片5)倒置光学显微镜6)64孔板,未做任何清洗,用于液滴小球的观察;2mL的EP管,未做任何清洗,用于液体小球的收集;7)FluoSurf 2wt%表面活性剂(已过期)和多相水相液体。注:客户使用未过期的FluoSurf表面活性剂产生液滴小球。测试过程:1)在恒定压力下,把油相和水相注入到COC芯片通道内。2)在OB1 MK4设备的操作软件ESI上设置闭环流量控制,实现油相和水相液体以恒定、无脉冲的流速注入到芯片入口。3)倒置光学显微镜上的目镜和配套软件观察芯片中的液滴产生。测试结果:FluoSurf 2wt%(已过期)表面活性剂在COC芯片中可以产生稳定、均匀的液滴小球。高性能压力流量控制器OB1 MK4,结合科式流量计BFS1+和数字流量传感器MFS2,实现稳定的两相液体流动。微液滴直径40μm(未作任何清洗的64孔板中观察液滴小球)测试装置照片:
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