2025-01-10 17:04:57生物常温电镜的应用技术
生物常温电镜的应用技术主要用于在接近生理条件的常温下,对生物样本进行高分辨率成像。该技术能够捕捉生物分子的动态过程,揭示生物样本在接近自然状态下的结构与功能关系。通过减少样本制备过程中的冷冻损伤,生物常温电镜提供了更真实的生物结构信息。此外,它还被广泛应用于药物研发、病毒学研究及细胞生物学等领域,助力科学家深入理解生命科学的奥秘。

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2023-06-21 16:19:22大分子药物生物分析中的主要应用技术
生物大分子药物目前主要包括治 疗性蛋白药物与核酸药物等,随着生物技术的迅速发展,生物大分子已被普遍用以治 疗肿瘤、本身免疫系统疾病和遗传代谢病等多种疾病。生物治 疗药物在临床和商业上的成功引起了行业内对其开发的日益重视,需要高质量的生物分析来支持这些药物的开发。与常规药物一样,评估大分子药物的安全性和有效性需要彻底了解其药代动力学(PK)、药效学(PD)、毒代动力学(TK)以及免疫原性等特征。在药物与机体相互作用中,PK是研究机体对药物的处置作用,而PD和TK是分别研究药物对机体有益/有害的效应。PD/PK和PK/TK的相互关系是药物药理学评价的核心。FDA、NMPA等监管机构要求药物进入临床前必须证明其有效性和安全性,临床前和临床研究均需要研究药物的PK,同时FDA建议对免疫原性风险检测最 好在IND阶段和临床I期开展。因此,建立好的PD/PK/TK等生物分析方案对于大分子药物的临床前及临床分析评价极为重要。与小分子药物相比,大分子药物具有分子量大、结构复杂、细胞外基质不容易透过、使用量低、身体易溶解等特性,其生物分析充满挑战。生物大分子药物与传统小分子药物的药代动力学特征比较(药学进展 ,2018年8期 )传统的生物分析方法通常依赖于基于小分子检测的液质联用系统和基于生物制剂的配体结合分析(ligand-binding assay,LBA)),目前这两种方法也用于抗体等生物药的生物分析中。在现在的创新药物中,还有mRNA、病毒载体、细胞治 疗产品等,这些药物本质上并非蛋白质药物,因此qPCR、流式细胞术、成像技术等手段也越来越多地用于生物药的生物分析中。01、基于配体结合分析生物分析中基于配体结合分析LBA是一种常用的分析工具,用于根据与其他生物分子的相互结合作用(binding interaction),定量测定生物分子(目标分析物,Analyte)在生物体液中的浓度,主要包括酶联免疫(ELISA)等。目前ELISA是生物制药行业使用最广泛的配体结合式(LBA)检测平台,它一直以来都是蛋白质定量分析最常用的技术,现在大多数生物标志物的商业检测试剂盒都是基于ELISA的。这项技术对于某些临床前生物分析的应用仍然很有吸引力,比如血清单克隆抗体的PK。但是ELISA操作复杂、测试运行时间长,采用自动化平台可缩短分析人员操作的时间, 提高工作效率。丹纳赫生命科学旗下贝克曼库尔特的Biomek i7自动化工作站结合美谷分子仪器的SpectraMax i3 多功能酶标仪,可以自动化地对样本进行高通量的ELISA操作,大大避免实验误差及重复的人工劳动。自动化工作站进行ELISA实验流程自动化工作站进行ELISA实验的结果02、液相色谱串联质谱检测系统LC-MS/MS与LBA 相比,LC-MS/MS 在生物分析中的优势在于可以提供快速的方法开发和验证、高特异性和高重现性,还可以实现多种分析物同时定量。另外,LC-MS/MS 方法也更容易在不同的分析物类别和基质之间转移。但是灵敏度、样品制备、方法开发和定量准确度相关的难题也亟需解决。丹纳赫生命科学旗下SCIEX开发了一种通用的混合LBA和LC-MS/MS两种技术的工作流程,该工作流程结合了这两种技术的优势,可用于蛋白质药物的PK分析。该方法检测阿达木单抗在小鼠血浆中的浓度,先用磁珠方法进行免疫亲和性样品的制备,然后将阿巴利单抗标准品进行消化后进入TripleTOF™ MS系统进行肽图谱分析,用以选择蛋白质定量的特征性肽段。在QTRAP 6500+系统进行定量分析后,50 到 10000 ng/mL 的线性关系可达0.99763,定量限为50 ng/mL。LC-MS/MS方法的前处理流程阿达木单抗的提取离子色谱图   SCIEX QTRAP™ 6500+ 系统03、qPCR技术qPCR法是常用的分析核酸药物表达量的一种方法,其定量下限可以达到pg/mL甚至fg/mL,这可以极大增强药物在体内暴露的检测时间。此外,RT-qPCR使用的样本量极少,只需要几微升血浆样本或1毫克组织即可满足分析需求,减少了对珍贵样本的使用,而且能够使用384孔板实现对样本的高通量分析。然而获得信号特异、低背景的qPCR结果也非易事,丹纳赫生命科学旗下IDT埃德特的双淬灭荧光探针,在靠近报告基团9bp左右的位置增加一个中间淬灭基团,为FRET作用中提供了一个能量的“中转站”,拉近了能量传递中每个基团间的距离,从而提高了荧光淬灭率降低了背景信号。IDT 双淬灭荧光探针示意图(蓝色序列片段即为双淬灭荧光探针)在过去20年中,新型治 疗方式的出现改变了生物分析领域的现状,导致了一系列技术的发展和成熟。在发现阶段以及药物开发的临床前和临床阶段,健全的生物分析方法非常重要,这将有助于开发更安全、更有效的药物,同时减少开发的时间和成本。丹纳赫生命科学一系列先进的生物分析工具和方法能够有效帮助应对创新药物复杂结构和不同作用机制对PK、PD和免疫原性评估提出的重大挑战。
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2024-11-26 15:53:42原子荧光光度计有哪些应用技术?应用技术核心是什么?
在现代分析化学中,原子荧光光度计(Atomic Fluorescence Spectrometer, AFS)作为一种重要的仪器,广泛应用于环境监测、食品安全、临床诊断以及材料分析等领域。原子荧光光度计的基本原理原子荧光光度计是一种基于原子光谱分析的仪器,主要用于定量分析金属元素的微量含量。其基本原理是:通过激发待测元素的原子,使其从基态跃迁到激发态,随后原子通过辐射方式返回到基态,从而释放出特定波长的荧光。原子荧光光度计通过测量这些荧光信号的强度,来确定样品中元素的浓度。与传统的原子吸收光谱(AAS)相比,原子荧光光度计的灵敏度更高,能够检测极低浓度的元素,尤其在重金属分析中具有显著优势。例如,它能精确检测水体、土壤、空气中微量的铅、汞、砷等有害金属元素,因此成为环境监测和污染检测领域的重要仪器。原子荧光光度计的核心技术原子荧光光度计的核心技术之一是“光源”和“探测器”的设计。常见的光源有电热原子化炉和氩气火焰,而探测器通常采用光电倍增管(PMT)或光谱仪,来捕捉荧光信号。设备内部的激发光源通过产生紫外线或可见光来激发样品中的元素原子,而荧光信号的强度则由光电倍增管进行检测并转化为电子信号。原子荧光光度计的灵敏度和精度也受到其样品前处理技术的影响,通常需要配备高效的样品前处理设备,如原子吸收光谱分析的火焰原子化器、石墨炉等。合理的实验室环境控制,如温度、湿度以及气流,也会直接影响到仪器的性能和检测结果。原子荧光光度计的应用领域原子荧光光度计的应用领域极其广泛,主要包括:环境监测:广泛应用于水质、土壤、空气中重金属的检测。例如,通过检测水中的铅、镉、汞等金属元素含量,帮助判断水体是否符合环保标准。食品安全:用于检测食品中的有害金属元素,如铅、砷等,确保食品的安全性。临床诊断:在临床医学中,原子荧光光度计用于检测人体血液、尿液中的微量元素,如铅、汞、砷等,帮助医生进行早期诊断。材料分析:在材料科学中,原子荧光光度计用于研究合金、金属材料中的微量元素,保证材料的质量和性能。矿产资源勘探:用于矿产中的金属元素分析,帮助评估矿产资源的经济价值。原子荧光光度计的外观设计原子荧光光度计的外观设计通常以功能性为主,仪器的操作界面包括显示屏、控制按钮和取样装置。大多数现代设备具备简洁易懂的操作界面,方便用户进行仪器设定、数据分析和结果输出。
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2023-04-17 15:26:25常温电镜公开课第8讲丨高压冷冻组织样品的电镜制样技术
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2025-02-01 12:10:13有没有显微镜看不到的生物
有没有显微镜看不到的生物? 在现代科学技术日益发展的今天,显微镜被广泛应用于生物学、医学等领域,帮助人们观察到极为微小的生物体。科学家们常常会遇到这样一个问题:即使借助了先进的显微镜技术,某些生物依然无法被直接观测到。这引发了一个深刻的问题:有没有显微镜看不到的生物?本文将从多个角度探讨这一话题,分析显微镜的局限性以及存在于显微镜下不可见的微观生物。 显微镜的局限性 显微镜是我们观察细胞、微生物以及其他微小生物的主要工具,尤其是光学显微镜和电子显微镜。显微镜的分辨率有限,能够观察到的小物体尺寸受到物理原理的限制。一般来说,光学显微镜的分辨率为0.2微米,这意味着比这个尺寸小的生物体就无法通过光学显微镜进行观察。尽管电子显微镜的分辨率更高,可以观察到纳米级别的物体,但这依然无法捕捉到某些极为微小的生命形态。 量子级别的微生物:无法被观察到的存在 科学家们已经发现,存在一些比目前显微镜技术能够观察到的尺寸还要微小的生命形态。例如,某些量子级别的微生物或细胞,其大小甚至低于单个分子,远小于当前任何仪器能够识别的范围。科学家们对一些虚拟生命形式的猜测也表明,存在一些可能以量子力学为基础运作的生物体,可能完全超出了我们现有技术的理解和捕捉能力。 非传统生命形式:暗物质中的生物假设 除了物理尺寸的问题,科学界对于生命形式的定义也在不断发展。近年来,一些科学家提出了“暗生物”的概念,即存在于暗物质或暗能量中的生物体。由于暗物质和暗能量目前无法通过传统的光学显微镜探测,科学家们对这些假设生命体的研究还处于理论阶段。这些生物可能具备不同于我们已知的物质和能量特性,因此无法被现有的显微镜技术探测到。 总结:显微镜下的盲点与未来科学的可能性 显微镜无疑是生物学研究的一个强大工具,但它也有着不可忽视的局限性,尤其是在分辨率和技术范畴上。除了尺寸限制,生命的多样性可能超出了我们传统理解的范畴。随着科技的不断进步,未来可能会出现更先进的探测技术,帮助我们发现那些无法通过显微镜观察到的生物。这也促使我们不断探索生命的边界,不仅限于显微镜下的微观世界。
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2023-05-25 15:43:36培训邀约 | 日立高效液相色谱仪综合应用技术培训班
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