血管减压和神经修复 - 产品信息 - 相关知识

2025-01-10 17:05:28血管减压和神经修复: 血管减压和神经修复是一种针对血管压迫神经引起的疾病（如三叉神经痛、面肌痉挛等）的手术治疗方法。通过显微外科技术，将压迫神经的血管与神经分离，并在血管与神经之间置入减压材料，以消除血管对神经的压迫，从而缓解或消除症状。同时，对于受损的神经进行修复，促进神经功能的恢复。此方法具有创伤小、恢复快、效果确切等优点。

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2023-03-03 16:36:05荧光成像在血管神经外科手术中的优势: 荧光素和ICG荧光血管造影改变了血管神经外科医生的手术方式，它提供具有丰富信息的术中视图。2021神经可视化峰会是一个汇集quan球神经外科医生的特别活动，在此期间，A教授在一次家du网络研讨会上分享了他在荧光引导下的神经外科手术经验，介绍了几个临床案例。学习要点了解荧光素钠和ICG的历史以及它们在血管神经外科的首次应用探讨荧光技术在神经外科的优势，及其如何为神经外科医生提供有价值的信息观看荧光引导下的神经外科手术视频，包括动静脉畸形（AVM）、搭桥和动脉瘤手术的临床案例荧光成像在神经外科的应用：荧光素钠和ICG的历史及其首次应用荧光素钠自20世纪60年代末以来一直用于神经外科，最初由医生对其进行了描述，医生在开颅时进行了硬膜外血管造影术。吲哚菁绿（ICG）在很久以后才被应用于评估脑血流。它是由医生在21世纪初引入的，并决定将这种广泛应用于眼科的技术转移到神经外科。ICGzui早用于神经外科评估动脉瘤，并逐步应用于几种神经外科病症：评估旁路通透性、AVM手术、评估海绵状血管瘤手术和神经肿瘤学中静脉引流异常。目前，脑荧光血管造影使用ICG的情况更为普遍。荧光造影引导下的神经外科：荧光素钠与ICG的优缺点荧光素钠视频血管造影有一些优势，包括成本较低，精细细节的可视化，以及可以直接在显微镜下通过荧光过滤器进行观察。ICG需要单独的红外摄像机，可以将信息显示在不同的屏幕上。荧光素荧光也为无牵开器手术提供了有用的价值，这与手术创伤的降低密切相关。荧光素钠的另一个优点是作为一种相对惰性的染料，急性毒性研究显示尽管会诱发一些严重的过敏反应，但它对人类没有特殊危害。此外，成本也非常低。荧光素钠的缺点：它在血液中至少停留一小时，需要长时间等待后才能重复使用。ICG的半衰期为3至4分钟，因此可以在短时间内进行第二次或第三次注射。但在某些病人群体中，如对碘过敏的病人或甲状腺功能亢进的病人，它是禁用的。而且它价格昂贵。荧光造影在动静脉畸形（AVM）手术中的应用在一名患有左额叶动静脉畸形的患者中，选择了对侧入路，以避免优势半球，并更好地控制进料器。使用FL560术中荧光素荧光模块，可通过显微镜在手术野内精确地显示时间、给药器、静脉和AVM周围的短血管，并具有清晰的对比度。但在使用ICG时，用户必须查看另一个屏幕，而且无法看到AVM的周围环境。必须通过从显示器转移到手术野来进行解释。荧光素荧光更容易在手术野中直接识别供血血管，并将实质图像更好地可视化。图1：用FL560荧光素荧光模块观察AVM与用ICG观察AVM。图片由A教授提供。荧光造影在搭桥手术中的应用在一例烟雾病患者中，施行了颞浅动脉-大脑中动脉搭桥术(STA-MCA)。荧光素钠荧光对探索和检查STA以及在手术野直接看到动脉的功能非常有用。这是了解搭桥手术工作方式的一种非常有效的技术。它提供了良好的血管和组织灌注的可视化，尽管厚壁血管不太明显。图2：在搭桥手术中使用FL560荧光素荧光模块。图片由A教授提供。荧光造影在动脉瘤手术中的应用在一名患有中动脉小动脉瘤的患者中，使用荧光素荧光支持夹闭。造影剂有助于暴露动脉瘤，并在手术野中直接观察到穿支及其灌注情况。使用ICG可能会忽略这一点，因为它需要查看另一个屏幕，且呈现的是黑白图像。在荧光素荧光下，闭塞的动脉瘤清晰可见。但由于动脉瘤手术往往很快，而且厚壁血管也不太明显，所以无法进行重复使用。荧光素钠可与ICG结合使用，两者并不相互排斥。图注：利用FL560荧光素荧光模块进行动脉瘤夹闭。图片由A教授提供。综上所述，荧光素视频血管造影具有手术野三维可视化的优势，可以实时进行手术操作，尤其是对狭窄视野内的小血管。此外，它的成本更低。荧光素血管造影的缺点是无法观察到厚壁血管中的血流，而且染料在血液中停留的时间较长。ICG血管造影技术和荧光素血管造影技术为神经外科医生提供了重要优势。

2022-11-03 10:04:33LS18平铺光片显微镜成像案例—脂肪组织神经和血管的3D重构: 脂肪组织在机体能量稳态调控和体温调节中发挥着重要的作用。脂肪组织由不同类型的脂肪细胞以及脂肪细胞前体、免疫细胞、成纤维细胞、血管和神经投射物组成。目前分析脂肪组织的免疫组织化学和免疫荧光方法主要是基于对具有相对高倍率成像的薄切片。然而，这种方法存在着明显的局限性。首先，复杂的丝状结构，如交感神经和脉管系统，已知在脂肪功能中起着重要的作用，薄切片仅捕获一小部分组织，这可能导致结论因分析的组织部分不同而产生差异，很难通过薄切片进行评估。其次，由于脂肪组织独特的无定形形态特征，很难仅根据切片染色来评估脂肪组织的三维结构。鉴于这些因素，非常需要一种可提供整个脂肪组织的三维可视化并且保持高分辨率的方法。锘海生命科学自主研发的平铺光片显微镜具有三维成像速度快、对比度高、低光毒性、低光漂白等诸多优点。此外，依托于显微镜测样服务工作积累的丰富的组织透明化、组织免疫荧光染色及成像经验，锘海生命科学自主研发出了快速高效的锘海组织透明化试剂盒，大大提高样本组织透明化的效率，为广大科研工作者提供一套更为专业、完整的服务解决方案！我们使用TH对脂肪组织的神经进行标记，如下图1、2所示，为小鼠附睾脂肪神经成像3D重构结果。该脂肪组织大小为6.0x8.5x2.5 mm，成像分辨率为横向4 μm，纵向10 μm，成像时长仅4分钟。图1 小鼠附睾脂肪组织神经成像图2 小鼠附睾脂肪组织神经成像（局部图）我们使用SM22对脂肪组织的大血管进行标记，如下图3、4所示，为小鼠附睾脂肪组织大血管成像3D重构结果。该脂肪组织大小为6.0x8.5x4.0 mm，成像分辨率为横向2 μm，纵向10 μm，成像时长仅10分钟。图3 小鼠附睾脂肪组织大血管成像图4 小鼠附睾脂肪组织大血管成像（局部图）参考文献：[1] Chi J, Crane A, Wu Z, Cohen P. Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue. J Vis Exp. 2018 Jul 28;(137):58271. doi: 10.3791/58271. PMID: 30102289; PMCID: PMC6126572.[2] Wang P, Loh KH, Wu M, Morgan DA, Schneeberger M, Yu X, Chi J, Kosse C, Kim D, Rahmouni K, Cohen P, Friedman J. A leptin-BDNF pathway regulating sympathetic innervation of adipose tissue. Nature. 2020 Jul;583(7818):839-844. doi: 10.1038/s41586-020-2527-y. Epub 2020 Jul 22. PMID: 32699414.

2022-10-14 09:04:14直播回顾 |「大成学堂」DA(VTA)→5-HT(DRN)神经环路调控神经厌食症: 9月27日（周二）20：00，最/新一期「大成学堂」直播活动成功举办。本次直播，美国贝勒医学院刘海兰博士在线详解神经性厌食症新调控机制的前沿研究。该研究成果已发表在Nature Neuroscience上，题为“A D2 to D1 shift in dopaminergic inputs to midbrain 5-HT neurons causes anorexia in mice”。作为第一作者，刘海兰博士在此次直播中细致讲解了其研究的思路，并在线解答了大家的提问，获得满屏好评。没有赶上看直播或想再回顾精彩内容的小伙伴扫码即可查看直播回放首先，刘海兰博士介绍了研究背景。神经性厌食症作为一种高致死的精神疾病，近年来发病率显著上升，但是其发病机制并不明确、治疗手段也有限。目前基础研究和临床研究表明，神经性厌食症的病人伴随着多巴胺受体的多位点突变，这提示多巴胺神经系统的异常也与厌食症的发生发展有关。同时研究表明位于中脑腹侧被盖区（VTA）的多巴胺（dopamine）神经元和位于中脑中缝背核（DRN）的五羟色胺（5-HT）神经元能够参与调控包括进食在内的动机性行为，它们也被发现与神经性厌食症的发病机制相关。基于这些研究背景，随后刘海兰博士分享了研究的详细情况。其团队利用TPH2-CreER小鼠模型开展了系列实验，采用神经环路示踪技术和电生理技术，首次发现了中脑腹侧被盖区-中缝背核（VTA→DRN）的DAVTA神经元→5-HTDRN神经元环路调控食欲和神经性厌食症。主要研究过程，主要为以下四方面内容：低频刺激抑制DAVTA→5-HTDRN神经环路并通过 DRD2 促进摄食行为高频刺激激活DAVTA→5-HTDRN神经环路并通过 DRD1 抑制摄食行为DAVTA→5-HTDRN神经环路的活动调控神经厌食症5-HTDRN神经元中的 DA受体可调节神经厌食症状直播时观众们提问踊跃，但是由于时间限制无法一一解答。在这里，我们特意整理出部分提问文字版的解答~聊天区部分问题详解（文字版）1.研究神经性厌食症除了常见的转基因技术、电生理技术之外，是否有新的实验方法能尝试?答：在我们的课题中除了用了电生理，以及这些转基因小鼠模型之外，我们也使用了化学遗传学、光遗传学方法去慢性或急性的操控神经元的活性，同时我们也使用了光纤记录，实时记录神经元的活性改变。2.aba小鼠的成功率和存活率有多少?答：在这个过程中我们的那个存活率，因为我们这边动物protocal上限制的是如果小鼠的体重低于原始体重的80%，就必须要处死，所以我们算存活率是当小鼠体重降到它原来体重的80%的时候，我们就认为这只动物已经死了。所以在我们的aba模型中，通常到第三天左右就会有动物的体重低于原来体重的80%，然后随着到第四天第五天可能会有50%左右的小鼠体重低于80%。3.激活DRN中5HT神经元如何能减少进食？答：5-HT神经元它在摄食中的作用已经有很多报道了。有一些报道说5-HT神经元可以投射至下丘脑的POMC和AgRP神经元。POMC和AgRP神经元在摄食中的作用也是被许许多多研究证实的。POMC神经元它可以抑制AgRP神经元，激活食欲。而5-HT神经元可以通过它的受体抑制AgRP神经元，同时激活POMC神经元活性来抑制食欲。想观看本期全程回放识别下方二维码即可收看「大成学堂」以建立“全球精英分享先进技术，解析领域内研究热点”为宗旨的知识分享平台。栏目开播以来已开展了超10场直播活动，数十名海内外知名学者在此讲授生命科学学术理论、实验技术等课程。欢迎大家进入「大成学堂」专题页，学习相关课程。⬇扫码入群，提前获取后续直播课信息以及get到丰富的学术干货~

2023-05-16 09:55:18应用笔记 | Upd2/胰岛素调节能量感知神经回路: 弗雷德·哈钦森癌症研究中心的研究人员利用Aivia软件分析果蝇脂肪感知神经元，阐明了瘦素/Upd2和胰岛素在能量感知神经回路中的相反作用。准确和持续监测能量储备可以维持神经张力并驱动对于无脊椎动物和脊椎动物生存至关重要的行为决策。直到最近，脂肪感知神经元接收和反应脂肪储存信息的精确机制还不为人所知。研究人员Ava Brent和Akhila Rajan证明了脂联素Upd2诱导神经元结构改变，使其在营养过剩时释放胰岛素，并且胰岛素本身通过对同一神经回路的负反馈恢复神经张力。分析与脂肪储存相关的突触结构变化对于Brent和Rajan的研究，成像和分割神经元是至关重要的，因为他们需要分析神经元形态和结构的微小变化。他们专注于轴突末端的突触前结构（称为boutons）的扩张。使用Aivia软件，他们开发了一种图像分割协议来分析boutons，从而使他们能够系统地监测神经元结构。“Aivia的特点在于团队可帮助像我们这样试图做出不同事物的用户。在他们的帮助下，我们能够开发出Aivia工具，将我们使用基础形态报告生成的复杂成像数据编码成对象。然后，这些对象使用属性（如数量、体积、表面积和强度）进行描述。”Rajan说道。图1. Drosophila大脑中PI区域STAT表达神经元中Syt-GFP标记的boutons的分割分析（根据[1]的许可重现）。一个稳态回路由此产生的Aivia图像分析工具旨在应用于大量成像数据集，使Brent和Rajan能够同时计算bouton数量和分析结构变化。拥有他们的Aivia工具，他们开始研究在果蝇的脂肪感知神经回路中管理不同信号的提示。Brent和Rajan喂食高糖饮食来模拟养分过剩，监测Upd2和胰岛素水平以及突触小结的数量。他们的Aivia图像分割工具揭示了Upd2依赖性的突触小结数量下降，因此突触接触减少。这种突触接触的减少释放了对胰岛素分泌的“夹子”，从而使激素能够在营养过剩的情况下被释放。进一步分析他们的图像，Brent和Rajan还确定了涉及细胞骨架重塑的几个基因的表达发生了改变，包括Aru和Bsg，这表明Upd2依赖性的突触小结改变是由于肌动蛋白细胞骨架重组造成的。令人惊讶的是，在高糖饮食5天后，突触小结数量恢复到基线水平，这表明存在负反馈机制。出乎意料的是，研究人员发现胰岛素本身对神经回路产生了负反馈作用。图2. 抑制反馈促进Syt-GFP标记的boutons增加以响应胰岛素信号传导（经[1]许可转载）现在，研究人员已经知道了神经回路调节的具体方式，他们想确定重要的脂肪感受激素首先如何到达其靶神经元。“我们正在探究这些脂肪激素如何穿过血脑屏障，”Rajan说。“为了做到这一点，我们将再次依赖于成像脂肪激素转运，并希望应用我们之前使用Aivia的技术和工具。”

2022-06-23 14:13:21ibidi科普知识系列|血管生成实验小常识: 　　1、哪种细胞密度最适合我的实验？　　　　通常，我们建议每孔使用5,000-10,000个HUVEC。但是，确定最佳细胞数对于使用µ-Slide血管生成从管形成测定中获得最佳结果是至关重要。细胞密度取决于细胞类型和细胞大小。因此，在开始实际实验之前，我们建议在非抑制条件下播种几个细胞数并对管形成进行成像。然后，对于最佳测定条件，使用在您的实验中产生最多管数的细胞密度。请记住，细胞通常不会在凝胶基质上增殖。请参阅：血管生成实验实验装置优化和数据分析 |ibidi µ-Slide　　　　2、应该在哪个时间段内观察细胞？　　　　管形成的持续时间取决于细胞类型和所使用的细胞外基质，应单独确定。通常，HUVEC在 2-4小时后已经形成管。24小时后细胞开始发生凋亡，这导致从基质中脱离和管破裂。请参阅：血管生成实验实验装置优化和数据分析 |ibidi µ-Slide　　　　3、是否需要活细胞成像装置来每小时拍摄管形成测定的照片？　　　　非必须，通过显微镜对 µ-Slide 血管生成上的同一位置进行一致和精确的成像。可以使用显示 x/y 坐标的显微镜载物台或自动载物台来完成成像。使用自动化平台，可以将孔的所有位置（特别是每个孔的中心）保存到位置列表中，您可以在每个时间点访问相应的位置。　　　　但是，使用完整的活细胞成像设置在显微镜上建立生理条件要方便得多。使用ibidi Stage Top 孵育系统等活细胞孵育装置有助于在成像过程中提供稳定温度和湿度条件，从而在体外可以直接进行视频拍摄。　　　　4、是否可以使用 µ-Slide 血管生成在凝胶基质内培养细胞？　　　　可以，µ-Slide 血管生成非常适合在精确定义的3D基质中培养细胞。由于大界面的凝胶和顶部细胞培养基，凝胶中的条件可以通过更换上部储液器中的介质来调整。　　　　5、应该在管形成实验中使用含酚红的凝胶还是不含酚红的凝胶？　　　　对于使用µ-Slide血管生成的管形成测定中的相差显微镜，酚红不会干扰图片，并且由于其颜色，处理更容易。然而，当使用荧光显微镜时，酚红可能会干扰探头的波长。在这种情况下，应该使用无酚红凝胶。　　　　6、是否需要将µ-Slide Angiogenesis血管生成载玻片放入培养箱的湿室中进行凝胶聚合？　　我们建议将µ-Slide血管生成载玻片放入加湿腔中进行凝胶聚合。虽然反应室对于聚合本身不是必需的，但它可以最大限度地减少蒸发的影响。在高流量孵化器中，防止蒸发的足够百分比的湿度可能不会始终保持一致。 µ-Slide血管生成中的少量凝胶会很快变干，这会导致弯液面的形成。　　　　7、胎牛血清 (FBS) / 胎牛血清 (FCS) 浓度是否会影响管形成实验中的管形成和降解速率？　　　　一般是的。这取决于所使用的细胞类型或细胞系。当提供浓度高达 10% FCS 的细胞培养基时，我们在 µ-Slide 血管生成中观察到典型的原代细胞 (HUVEC) 管形成和 Matrigel® 上的几种内皮细胞系。但是，我们建议分别优化每个细胞系的 FBS/FCS 浓度。　　　　8、您是否推荐使用减少生长因子的 Matrigel® 进行管形成分析？　　对于使用µ-Slide血管生成的管形成测定，我们使用了减少生长因子的 Matrigel® 和未减少的 Matrigel®。请参阅：肿瘤学必备 | 血管生成实验介绍　　　　9、我们希望使用减少了生长因子的 Matrigel® 和无血清培养基以及 50 ng/ml VEGF。这足以刺激管的形成吗？　　　　可以，这种组合足以刺激ibidi血管生成实验室器皿中的管形成，而培养基中没有任何额外的生长因子。　　　　10、除了 Matrigel® 之外，您在试管形成实验中是否有使用其他凝胶的经验？　　　　原则上，任何凝胶都可用于µ-Slide血管生成管形成实验。细胞可以附着在表面上是很重要的。胶原蛋白、纤连蛋白和层粘连蛋白为细胞粘附提供了重要的结合基序。　　　　11、什么是管形成实验合适的阳性和阴性对照？　　　　建议使用阳性和阴性对照来减少管形成实验中的变量。阳性对照是预期细胞在其中形成血管的样本（取决于实验设置），从而向研究人员表明该实验已正确进行。阴性对照是与所有其他样品以相同方式处理的样品，但预计不会显示任何实验结果（例如，很少或没有管形成）。　　　　ibidi血管生成实验室器皿中管形成实验的最佳阳性和阴性对照很大程度上取决于所使用的细胞、凝胶基质和一般实验设置。因此，我们建议您查阅文献，了解您感兴趣的主题中成功使用的对照（阳性和阴性对照）。　　　　在下文中，您可以找到管形成测定中阳性和阴性对照的可能方法：　　　　如果需要分析特定化合物诱导血管生成的效力，则可以使用用已知血管生成诱导剂（例如 VEGF 或 FGF2）处理的样品作为阳性对照。浓度很大程度上取决于细胞类型和实验设置。　　　　如果使用原代细胞，预筛选的内皮细胞系（例如，HUVEC）在用特定生长因子处理后表现出明确的反应，可以作为阳性对照。　　　　对于某些细胞类型，形成管的能力还取决于所使用的凝胶基质。作为阳性对照，内皮细胞应在含有饥饿培养基（不含生长因子或血清的培养基）的生长因子减少的 Matrigel®上显示管形成。如果需要测试促血管生成物质，则使用饥饿培养基尤其重要，因为大多数细胞培养基都添加了生长因子。为了分析物质的真实效果，基质和培养基都必须不含任何生长因子。作为阴性对照，细胞可以播种在不同的基质（例如胶原蛋白 I）上，预计不会形成管状。　　　　不影响细胞活力的管形成抑制剂（例如，苏拉明或萝卜硫素）可用作阴性对照。如果实验的目的是测试抗血管生成物质，则使用这种类型的抑制剂尤其重要。　　　　如果用任何溶解的物质（例如，在 DMSO 或乙醇中）处理细胞，则仅使用溶剂作为阴性对照。　　　　12、是否有用于分析管形成实验的推荐染色方案？　　一般来说，相差显微镜足以自动分析 µ-Slide血管生成中的标准管形成实验。但是，如果您想研究某种标记，您可以应用您的标准方案（例如，用于免疫荧光染色），但要小心，以免损坏凝胶基质或细胞网络。　　　　使用calcein的染色方案示例可参阅：肿瘤学必备 | 血管生成实验介绍　　　　13、在开始实验之前，我是否必须将 ibidi 血管生成实验室器皿平衡到 37°C？　　　　不，不需要平衡 µ-Slide 血管生成。在室温下储存，可以立即用凝胶基质填充。由于µ-Slide 的开孔形式，加热时从凝胶中逸出的气体可以与大气自由交换。　　　　14、完成实验后，µ-Slide Angiogenesis和µ-Plate Angiogenesis 96 Well可以重复使用吗？　　　　不可以，µ-Slide血管生成载玻片和µ-Plate血管生成96孔板是一次性耗材，仅供一次性使用。　　　　15、µ-Slide 血管生成是否有96孔版的？　　有。 µ-Plate血管生成96孔板具有与µ-Slide血管生成相同的“孔中孔”设计和凝胶体积 (10 µl)。 µ-Plate血管生成96孔可用作高通量管形成实验的筛选板，具有完全的ANSI/SLAS (SBS) 和robotics兼容性。