Copure|菜籽油中苯并（a）芘测定

• 称取1g菜籽油样品于15mL离心管中（加标样品加入1μg/mL 苯并（a）芘标准品20μL），加入5mL正己烷，涡旋混匀1min，作为待净化液。

• 活化：BAP分子印迹柱预先用5mL二氯甲烷、5mL正己烷活化。

  
  

• 上样和淋洗：将待净化液转移进柱子，加2mL正己烷涮洗离心管后转移进柱子，待液面降至柱床时，用6mL正己烷淋洗，弃去流出液。（备注：菜籽油上样后离心管壁容易有残留，需加适量正己烷涮洗后转入小柱中，避免目标物损失。）

  
  

• 洗脱和复溶：用6mL二氯甲烷洗脱，收集洗脱液于氮吹管中，洗脱液中加入1mL乙腈，40℃氮气吹至近干，加入1mL乙腈超声复溶1min，过0.22μmPTFE滤膜后上机测定。

• 准确称取4mg左右苯并（a）芘于20mL容量瓶中，加入乙腈超声溶解并定容，作为苯并（a）芘标准储备液；再准确移取适量苯并（a）芘储备液用乙腈稀释至10mL容量瓶中，配制成1μg/mL苯并（a）芘标准中间液。再准确吸取适量中间液，用乙腈逐级稀释，得到浓度为0.5ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL的标准系列工作液。

• 仪器：ThermoFisher U3000液相色谱仪

• 色谱柱：Copure? C18液相色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)

• 流动相：A：水；B：乙腈

• 洗脱方式：A+B=12+88，等度洗脱

• 流速：1 mL/min，

• 柱温：30 ℃

• 进样量：10μL

• 检测器：荧光检测器，激发波长：384 nm，发射波长406nm

  菜籽油本底中苯并（a）芘色谱图

• 乙腈标准品和正己烷不互溶，导致结果不稳定？

  实验室验证结果：适量增大加标标准溶液的浓度，减小加标的体积，实验室验证移取体积不高于50μL时，乙腈标准品和正己烷溶解完全，加标回收结果稳定。

  
  

• 在测试苯并（a）芘时会出现本底值的情况？

  在测试中发现主要原因是因为正己烷，二氯甲烷等溶剂会有本底，导致在测试过程中会有本底值的情况发生。