色谱术语概念知多少？

理论塔板高度（H）

涡流扩散（又称多径效应）

纵向扩散（又称分子扩散）

色谱柱柱效（N）

灵敏度（Sensitivity）

灵敏度可通过 “信噪比（S/N）”“检测限（LOD）”“定量限（LOQ）” 量化：

? 检测限（Limit of Detection, LOD）：指 “能可靠判断有目标物质存在” 的最低浓度/量，常用基线噪声水平的 3 倍计算（即 “能看出有东西” 的最低值）；

? 定量限（Limit of Quantitation, LOQ）：指 “能重复、准确计算目标物质含量” 的最低浓度，常用基线噪声水平的 10 倍计算（需高于 LOD，避免低浓度下积分峰的结果波动）。除基线噪声 10 倍外，也可定义为能满足一定精密度要求（如 RSD ≤ 20%）的最低浓度。

分离度（R）

用 “跑道赛跑” 类比：色谱柱是跑道，不同分子是运动员，分离度就是 “判断运动员是否彻底拉开距离冲线” 的指标 ——

? 若两分子 “勾肩搭背” 一起冲线（色谱峰重叠），分离度小，说明 “未能有效分离”；

? 若两分子前后脚拉开明显距离（色谱峰完全分开），分离度大，说明 “分离效果良好”。

峰谷比

拖尾因子（Tf）与峰不对称性因子（As）

拖尾因子是量化色谱峰对称程度的核心指标，理想峰的拖尾因子为 1（完全对称）。

计算方式：从峰顶点作垂直于基线的垂线，在峰高 5% 处作平行于基线的直线（避免基线噪音干扰），直线与峰两边的交点将其分为两段（d1：垂线到峰前沿的水平距离；d2：垂线到峰后沿的水平距离），W0.05是 5% 峰高处的峰宽，即W0.05= d1+ d2。拖尾因子T= W0.05/2d1=(d1+d2)/2d1。

? 合格范围：常规要求 0.95 ≤ Tf ≤ 1.05（部分标准放宽至 0.9-1.2）；

在方法开发中，通常将拖尾因子控制在合理范围内（如 0.95 - 1.05），以满足分析方法的验证要求。

峰不对称性因子是对峰形偏离的 “细致补充”，与拖尾因子原理相通但计算角度不同：取峰高 10% 处峰后沿到垂线的水平距离（B）与峰前沿到垂线的水平距离（A）的比值。使用10% 峰高处的数值是为了避免基线干扰。

? 峰形判断：As＞1 为拖尾峰（峰后沿宽），As＜1 为前延峰（峰前沿宽）；

通过As可深入分析固定相与分析物的相互作用（如吸附差异），为优化分离条件提供细节依据。

上述参数并非孤立存在，而是相互关联、相互影响：

? 理论塔板高度（H）和色谱柱柱效（N）决定“分离效率基础”；

? 灵敏度决定 “检测低浓度物质的能力”；

? 分离度、峰谷比、拖尾因子/峰不对称性因子确保 “分离彻底、峰形合格”；

? 重复性、精密度与准确性保障 “方法稳定、结果可靠”。

在实际实验中，可通过调整流速（优化纵向扩散）、更换固定相（提升选择性）、控制柱温（改善峰形）等方式，联动优化这些参数，最终提升分析结果的准确性与重复性。