使用传统分选技术对非球形、尺寸过大或过小的细胞进行分选时,存在易堵塞管道、得率低、损伤大等难题。的光束整形-激光诱导向前转移(BS-LIFT)技术化身单细胞界的“变形金刚捕手”,打破传统瓶颈:
智能光斑:自适应变形,精准捕获异形细胞!
无损分选:非接触式操作零损伤!
? 精准研究:突破分选瓶颈,开启单细胞“精准捕捉”时代!
01
研究方法
1. 样品制备:
复苏酵母菌(1–5 μm)、乳酸菌(10–20 μm)和丝状蓝藻(50–100 μm)至对数期,同时取白蚁肠道鞭毛虫样本,点样至QuadGPS分选芯片上。
2. 光束整形-激光诱导向前转移分选:
1)观察与识别:50×物镜下观察细胞形态,通过图像识别和Gerchberg-Saxton(GS)算法匹配细胞轮廓,生成聚焦光斑阵列;
2)精准分选:选定目标细胞后一键分选,将其转移至接收器,用于后续研究。
02
研究结果
1. BS-LIFT精准分选复杂尺寸细胞
BS-LIFT系统通过图像识别成功分选1~100 μm的酵母、丝状蓝藻和乳酸菌(图1),实现多尺寸微生物细胞精准分离。
图1 BS-LIFT明场分选结果
图a 微生物单细胞明场成像(形态多样);图b 图像识别二值化结果;图c 分选激光动态分布;图d 分选后芯片状态(自上而下:酵母→乳酸菌→丝状蓝藻)
2.BS-LIFT精准分选复杂背景微生物单细胞
实验1:BS-LIFT系统根据形态差异自动区分并分选酵母与大肠杆菌,成功实现混合菌群精准分选;
实验2:在复杂背景中准确识别分选大肠杆菌(图2)。
图2 BS-LIFT复杂样本分选效
图a.明场成像;图b.智能识别二值化图像;图c.动态激光调制过程;图d.目标细胞分选结果;(自上而下:实验1酵母→实验1大肠杆菌→实验2大肠杆菌)
3. BS-LIFT精准分选复杂形态鞭毛虫单细胞
BS-LIFT系统通过自定义模式精准标记目标细胞(图3b,h),经智能光调制实现精确定位(图3c,i),并完整分选出鞭毛虫单细胞(图3f,l),成功实现复杂形态鞭毛虫的活性分选。
图3 BS-LIFT系统鞭毛虫细胞精准分选
图a,g 不同形态鞭毛虫明场图像;图b、h用户选定细胞位置;图c,i 智能激光定位;图d、j 分选后原位置成像;图e,k 分选前接收器空白对照;图f,l 接收器成功捕获活性鞭毛虫
03
结论
在LIFT分选基础上,采用光束整形+GS算法黑科技,实现了1-100 μm全尺寸微生物单细胞及原虫的精准捕获;面对复杂背景干扰和微生物多样化形态,轻松实现酵母菌、大肠杆菌、鞭毛虫等的精准分选,为单细胞及原虫研究提供前沿解决方案。
04
应用优势
光束整形黑科技加持,BS-LIFT技术突破传统分选瓶颈,单细胞组学研究迎来“变形金刚捕手”!
? 1-100 μm全尺寸细胞分选,酵母/细菌/鞭毛虫一机搞定;
? 各种奇葩形态统统拿下,原虫研究从此开挂;
? 非接触式操作,细胞零损伤,再复杂的单细胞都能“温柔以待”。
参考文献:
Liang, P., Shang, L., Wang, Y., Booth, M. J., & Li, B. (2021). Laser induced forward transfer isolating complex-shaped cell by beam shaping. Biomedical optics express, 12(11), 7024–7032. https://doi.org/10.1364/BOE.4390
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体验LIFT分选之“变形金刚捕手”!
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