图1：微生物的来源，引自《Case Studies of Microbial Contamination in Biologic Product Manufacturing》
但是你知道吗？微生物污染中的“刺儿头”-孢子，可没有那么容易搞定，因为它对常规的清洁条件-NaOH-具有很强的耐受性。所以我们仍然需要一个更有效的备选方案，那就是氧化剂。接下来，我们一起来看一个可能你还不知道的：过氧乙酸 (peracetic acid, PAA) 在MabSelect PrismA上进行微生物污染消毒的应用研究。
实验结论
分别在cycle 0、40、80使用30 mM PAA对MabSelect PrismA处理15 min，填料在120次使用寿命内，收率和纯度无显著影响；
杂质，如聚集体、HCP水平在整个研究过程中保持稳定、一致；
120次使用寿命内的研究数据可以充分支持我们在MabSelect PrismA使用期间进行2~3次的PAA消毒处理，为生产中袍子去除提供了一个有效的备选方案；
在此研究中，PAA的处理方式仅作为一个指导方案。在实际生产中，我们需要结合具体情况来决定合适的消毒频率。
实验结果
填料的寿命研究结果
收率随着填料的使用而缓慢下降，但均≥75%（见图2）；
在120个cycles内，DBC下降为初始的58%~69%（见图3）；
HCP在PAA处理前后无显著差别。PAA处理后的水平在100-300 ng HCP/mg mAb，未进行PAA处理的为200-300 ng HCP/mg mAb。（见图4）；
Protein A的脱落水平是比较低的，＜45 ng ligand/mg mAb（经过PAA处理）和35 ng ligand/mg mAb（未经过PAA处理）（图5）。在第40和80的cycles经过PAA处理后加强prismA配基脱落的检测频率；
洗脱体积和层析图谱无显著变化（见图6和7）。
左右滑动，查看更多
其他设备材质对PAA的兼容性调查
PAA是一种强氧化剂，所以我们需要充分考虑其和过流部件材质的兼容性。根据文献和硬件产品的化学兼容性信息，汇总见表1。根据表1数据，在我们所进行调查的设备的过流部件中，物料材质均耐受实验研究中使用的PAA实验条件（20 mM、30 min或30 mM、15 min）。
表1：层析柱AxiChrom和BPG、RTP柱子和一次性层析系统AKTA ready flow kits的过流部件材质和PAA的兼容性汇总
实验物品和方法
① 样品：
经过澄清处理后的mAb (IgG1) ，conc.=2.1 g/L。
② 实验方法：
层析柱：MabSelect PrismA，Tricorn 5/100，h=10 cm，CV=2 ml。
系统：AKTA pure。
按照表格2执行120次运行，上样量=56 g/L resin (80% DBC，at Qb10) ，保留时间RT=6 min。CIP条件为：0.5 M NaOH。层析柱在第0、40、80次使用的时候插入30 mM PAA处理（见表3）。未处理的PAA对照组整体实验流程保持相同，也是同步进行120次使用研究。
表2：MabSelect PrismA纯化步骤的工艺参数
表3：PAA在MabSelect PrismA的寿命研究过程的处理条件（分别在第0/40/80 cycle进行）
更多相关内容，欢迎扫码下载
《生物制造工艺强化策略》白皮书
参考文献：
https://www.lifesciences.com/en/us/solutions/bioprocessing/knowledge-center/sanitization-of-protein-a-affinity-resins
相关阅读：
? MabSelect PrismA真实的寿命验证案例分享
声明：本文为作者原创S发，严禁私自转发或抄袭，如需转载请联系并注明转载来源，否则将追究法律责任
点亮
与
，传递信息 ↓ ↓
全部评论(0条)
相关产品推荐（★较多用户关注☆）
美国Cytiva SimpliNano微量分光光度计
报价：面议 已咨询 3490次
美国Cytiva GE AKTA Start实验室蛋白质层析系统
报价：面议 已咨询 8719次
美国Cytiva GE ReadyToProcess WAVE 25 波浪生物反应系统
报价：面议 已咨询 9743次
美国Cytiva AKTA Pure 蛋白质层析纯化系统
报价：面议 已咨询 16595次
美国Cytiva Ultrospec 9000/9000PC紫外-可见光分光光度计
报价：面议 已咨询 4746次
美国Cytiva GE MicroCal VP-DSC差示扫描热量计
报价：面议 已咨询 4831次
美国Cytiva GE Amersham™ ECL™ Gel system 预制胶水平蛋白电泳系统
报价：面议 已咨询 3953次
美国Cytiva GE Typhoon FLA9500多功能生物分子成像仪
报价：面议 已咨询 6741次
你可能还想看
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
热点文章
近期话题
相关产品
在线留言
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论