辣椒粉中罗丹明B含量测定的整体解决方案—BJS201905

基质：辣椒粉

样品提取：

试样前处理提取：准确称取1 g（精确至0.01 g）试样置于50 mL塑料离心管中，准确加入10.0 mL含0.1%甲酸的甲醇水(1:1)溶液，混匀，加入陶瓷均质子两颗，于旋涡混匀器上涡旋15 min，于8000 r/min离心10 min，取3 mL提取液层溶液过0.45 μm PTFE亲水滤器后待净化。

SPE小柱操作：

SPE：CNW Poly-Sery MCX SPE小柱(粒径40 um，60 mg/3 mL）（货号：SBEQ-CA3279）；

活化：3 mL 甲醇，

平衡：3 mL 水，

净化：准确移取1.0 mL提取液

淋洗：3 mL 0.1%甲酸水溶液、3 mL水、3 mL甲醇

洗脱：6 mL 5%氨水甲醇溶液

并收集洗脱液，洗脱溶液在45°C下，用氮气吹至近干，残渣用1.0 mL 含0.1%甲酸的35%乙腈水溶液溶解，过0.45 μm PTFE亲水滤器（货号：SCAA-113）上机测定。

加标样品：

加标水平0.1 μg/g（对应上机溶液浓度10ng/mL）：称取样品后，加入罗丹明B标准使用溶液（1 μg/mL） 0.1mL，后续操作同上；

加标水平0.5 μg/g（对应上机溶液浓度50ng/mL）：称取样品后，加入罗丹明B标准中间液（10 μg/mL） 0.05mL，后续操作同上；

前处理注意事项：前处理过程中提取液需过滤后再过SPE小柱；含5%氨水的甲醇溶液现配现用。

液相色谱

a) 色谱柱：C18柱，4.6 mm×150mm，粒径5 μm（货号：LAEQ-461571）。

b) 流动相：A为0.1%甲酸水溶液，B为乙腈，

c) 流速：1.0 mL/min。

d) 柱温：35°C。

e) 进样量：10 μL。

f）激发波长：550 nm；发射波长：580 nm；梯度洗脱程序见表3

图1 罗丹明B标准溶液谱图（10 ng/mL）

图2 样品加标（上）和样品空白（下）叠图谱图（样品加标10 ng/mL）

4.1 标准曲线数据

以标曲的峰面积与标曲上机浓度绘制标准曲线。

标准曲线：y = 1637.7x - 86.745，R2 = 0.9999

4.2 加标回收率数据

辣椒粉样品的加标回收率数据见下表。

表1 辣椒粉基质的加标回收率数据n=3

使用标准品和相关耗材，参照《BJS 201905 食品中罗丹明B的测定》，对于辣椒粉样品中罗丹明B进行检测，加标回收率在90%左右，RSD均小于5%，该方法操作简便稳定。标准品和相关耗材能够很好的满足辣椒粉等基质中罗丹明B含量的检测。