样品前处理
取2mL冰红茶于10mL容量瓶，加入TCEP溶液4mL，再加入TCA溶液2mL，混匀，静置反应5min，用水定容，混匀。转移至离心管，5000r/min离心1min。取离心上清液1mL于20mL容量瓶，加入乙酸铵溶液1mL，用流动相定容至刻度，混匀。取适量过0.22μm水系微孔滤膜至棕色瓶。
色谱条件
色谱柱：Athena VC-C18 液相色谱柱4.6×150mm,4μm(PN:LAEQ-4615061 )；
流动相：量取水900mL于烧杯中，吸取 40%TBAH溶液3.25mL、称取乙酸铵3.85g置于水中，然后加入TCEP 50mg，再加入乙腈10mL，混匀后用冰乙酸（约3.14mL）调pH至4.76，最后加水稀释至1L，混匀，超声除去气泡；
柱温：30℃；
流速：1.0mL/min；
进样量：10μL；
检测器：UV 265nm。
实验谱图
图1 L-抗坏血酸(5.0μg/mL)、D-异抗坏血酸(5.0μg/mL)标准溶液色谱图(分离度＞3）
图2 冰红茶基质空白谱图
图3 冰红茶基质加标(加标量 50μg/mL)谱图
图4 冰红茶基质加标(加标量 500μg/mL)谱图
图5 连续进冰红茶基质加标(加标量 500μg/mL)100 针比对谱图
实验数据及结论
使用Athena VC-C18液相色谱柱(4.6×150mm,4μm,PN:LAEQ-4615061)，参考GB 5009.86-2025第一法测定冰红茶中的L-抗坏血酸和D-抗坏血酸，结果显示，L-抗坏血酸和D-异抗坏血酸出峰时间稳定、峰形好、柱效高、分离度好，回收率90%~110%，RSD值小于1%；进样100针后，出峰时间仍稳定，且依然具有良好的峰形、柱效和分离度，完全满足 GB 5009.86-2025食品安全国家标准 食品中抗坏血酸的测定要求。
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