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菲罗门 DreamHsil C-H-L 色谱柱方法开发建议

来源:广州菲罗门科学仪器有限公司 更新时间:2026-04-15 10:15:31 阅读量:34
导读:DreamHsil C-H-L色谱柱有很强的极性化合物保留能力并伴有极佳的峰形,同时具备对疏水化合物保留能力。

      为让广大客户最大程度的用好 DreamHsil C-H-L 色谱柱,以解决各种超大极性酸、碱化合物保留问题,峰拖尾问题,极性与疏水化合物共保留等众多问题。以下方法开发建议请了解并参照。


      DreamHsil色谱柱虽然可以在正相NP),反相RP,超临界SFC)以及水性正相ANP)四种模式中随时切换使用,但是 ANP 分离模式,是此色谱柱的最核心应用焦点。该模式下的方法也极适合 LC-MS下分析各类普通 C18 所保留不了的大极性化合物,并且极大提升灵敏度。因此,当启用 DreamHsil C-H-L 色谱柱时,采用以下的ANP 模式的开发方法十分有必要。也是它区别于任何其它色谱柱的一个典型特征与效果。

一、对于要采用 UV检测器并且使用 195nm-210nm 之间的末端吸收波长的客户流动相设置建议

A相:水(含0.1%磷酸或0.1%TFA)     B相:乙

梯度设置(100mm长色谱柱为例)建议

时间(分)

A 相(%)

B 相(%)

0

5

95

1

5

95

5

50

50

7

80

20

8

5

95

二、对于要采用MSELSD, CADUV(非末端吸收波长)检测器的用户流动相设置建议

(1)酸性体系    A相:水(含0.1%甲酸)       B相:乙腈(含0.1%甲酸)

(2)近中性体系  A相:10mM甲酸铵     B相:95%乙腈+5%10mM甲酸铵

时间(分)

A 相(%)

B 相(%)

0

5

95

1

5

95

5

50

50

7

80

20

8

5

95

说明:

一.相从高比例变化到50%时,一般是个重要的窗口,大部份方法中,如果在50%相时,样品都已洗脱,那么后续方法调整中,50%相后,可直接分钟切回95%

二.柱长50mm,时间一般设置5分钟内;柱长150mm,时间一般设置12分钟内;柱长250mm时间一般设置 20分钟内。根据峰形与分离度,调整梯度速度与总时间。

三.以上方法同时适合 DreamHsilAmide与 DreamHsilC11-WCX色谱柱。在使用C11-WCX分析核苷酸类样品时,更建议采用上述第二条中的第(2)种流动相。

020-22826668
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