MNNG诱导胃癌动物模型的建立(gastric cancer,GC)

胃癌（gastric cancer,GC）是恶性肿中常见肿瘤之一，在消化道的恶性肿瘤中约占 50％。胃癌的发病机制与胃黏膜损伤、亚硝基化合物攻击及幽门螺杆菌感染等因素密切相关，是一个联合了多因素、多阶段的发生、发展过程。所以建立胃癌模型，对于研究和防治胃癌是至关重要的。

N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）是一种N-亚硝基化合物，属于可直接与 DNA作用的遗传毒物,通过直接靶定 DNA 而诱发细胞产生遗传毒性应激,并导致染色体异常、姐妹染色单体改变、点突变以及细胞死亡，是化学致癌物诱变机理研究中常用的一种模式化合物。

图1 MNNG分子结构

选取动物时，一般要求其饲养方便，癌诱发率高，目前全世界范围内主要选用大鼠、小鼠、裸鼠等小动物建立模型，选取大动物的一般较少，根据实验结果的各种需要，也有人选取犬、雪貂、旱獭等建立胃癌动物模型。因为大鼠、小鼠等成本低廉，容易饲养，取材方便，而且诱癌周期相对较短，所以在实验研究中常常大批量运用，其中 Wistar 大鼠因为诱癌率较高，常常为首选动物之一。

取6 g的MNNG粉末，加入DMSO溶液约30 mL，使其充分溶解配制成20%（w/v）的溶液，再用超纯水定容至浓度为10 mg/mL的母液，置于4℃冰箱避光保存，临用前再取适量母液用超纯水稀释至浓度为100µg/mL。

1、喂养第1周起给予浓度为100 μg/mL MNNG的溶液作为常规饮用水。

2、饲养8周后，用上述饮用水配制粉状饲料替代原来使用的块状饲料喂饲大鼠。

3、24周后仍改用块状饲料喂养，但MNNG水剂改为隔天给予。

4、28周停止给予MNNG饮用水，改用自来水喂养。

图2 大鼠胃组织的组织病理学检查（放大×200）（引用自：https://doi.org/10.3390/）

实验采用雄性Wistar大鼠，7-8周，口服灌胃MNNG（200 mg/kg BW），周期60天，检测（A） H&E染色切片、（B）caspase 9、（C）Bax和（D）Bcl-2蛋白的IHC染色切片。