口腔癌动物模型的建立（oral cancer，OC）

口腔癌是发生于口腔黏膜的恶性肿瘤, 绝大多数为鳞状细胞癌, 包括发生于舌、颊、口底、唇、牙龈等黏膜的癌瘤。口腔癌发病率高, 且侵润和转移出现较早, 目前临床尚无好的治疗方法, 因此口腔癌动物模型的研究一直受到重视。

4-硝基喹啉-N-氧化物（4-Nitroquinoline N-oxide，4-NQO）是一种水溶性喹啉衍生物，能够通过氧化应激损伤和抑制DNA合成等机制诱导鳞状细胞癌的产生。4-NQO诱导肿瘤的产生具有组织特异性，口服主要诱导口腔及上消化道系统肿瘤的形成，皮下注射主要诱导肺癌的形成。

图1 4-NQO分子结构

4-NQO可以诱导大多数动物发生口腔癌，但是此类模型主要应用于啮齿类动物（如大鼠和小鼠）。

用无菌蒸馏水配成0.1%浓度, 置于4 ℃冰箱避光保存, 用时以自来水配成300 mg/L置于避光瓶内自由饮用。

1、实验组68只小鼠为例：300 mg/L 4-NQO饮水喂养8～20周, 后改用自来水喂养至40周, 实验第9～40周每2周随机处死4只；

2、对照组34只小鼠, 自来水喂养, 实验第9～40周每2周随机处死2只作为同期对照。

1. 肉眼观察：小鼠精神状况、活动度、进食、饮水量、饮药量及毛色情况, 每周记录小鼠体质量, 饮水量, 饮药量。每周掰开小鼠口腔观察口腔内变化, 记录口腔内黏膜色泽, 质地等是否改变, 是否有斑块、溃疡或肿物出现。

2. H&E染色观察：处死小鼠后立即取全舌、牙龈、口底、颊、腭、唇、颌下淋巴结、颌下腺、食管、胃、肝、脾、肺、肾、小肠、大肠等组织，进行H&E染色，做病理学观察。

3. 免疫组化广谱细胞角蛋白 (pan-ck) 染色观察，pan-ck兔抗鼠多克隆抗体在癌细胞内为阳性反应。

图2 小鼠口腔癌颌下淋巴结转移大体及组织病理学观察（引用自：DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2012.04.064）

A:28周时实验组一小鼠口底肿物 (黑色方框内) ;B:小鼠口底肿物为鳞状细胞癌 (HE×200) ;C:小鼠双侧颌下淋巴结肿大 (图中黑色箭头所指) ;D:淋巴结中已有转移灶 ( (HE×200) ;E:淋巴结广谱细胞角蛋白染色阳性 (IHC×200)。

YEASEN提供4-NQO纯度≥98%