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显微课堂 | 显微镜测量校准:为什么要这样做?

来源:徕卡显微系统(上海)贸易有限公司 更新时间:2026-03-26 17:00:31 阅读量:108
导读:显微课堂 | 显微镜测量校准:为什么要这样做?


定期校准显微镜可确保为科学和工业应用提供精确、一致和可靠的测量结果

通过将显微镜的测量结果与已知的参照物或标准进行比较和调整,校准有助于确保长期为多个用户提供准确可靠的结果,增强测量的可信度。根据国际、地区或组织准则或标准,也可能需要进行校准。校准显微镜对于某些应用和行业至关重要,如检测、质量控制、故障分析、研发&D、科学研究以及汽车、航空航天、电子和医疗设备行业。显微镜校准既可以由用户直接完成,也可以利用徕卡显微系统提供的专业服务。建议在显微镜安装、维修或升级后立即进行校准,并且每年至少重复校准一次。


核心要点

  • 显微镜校准为何重要:仪器测量的准确性和可靠性、校准如何验证测量结果、影响结果准确性和可靠性的因素,以及履行准则和标准等问题都在讨论之列。

  • 如何校准显微镜:有不同类型的光学显微镜可供选择,如立体显微镜、复合显微镜和数码显微镜,但如今测量通常使用数码显微镜摄像头和软件,而不是目镜视网膜。

  • 分步校准指南:详细描述了使用云台测微计作为测量基准,对安装了数码相机的显微镜进行校准的过程。共显示6个步骤,包括生成校准报告。

  • 用于校准的实用显微镜配件:在进行显微镜校准时,配件可以提供帮助,例如清洁光学镜组和进行精确的水平平台移动。

  • 专业校准服务:徕卡显微系统提供定期校准显微镜的服务。

显微镜校准可确保检测、质量控制(QC)、故障分析和研发(R&D)所需的测量准确一致。本文介绍了校准步骤。使用参照物进行校准可使结果具有可重复性,并有助于确保与准则和标准一致。为了获得准确一致的结果,建议校准显微镜并定期检查。如有需要,可向校准专家寻求支持。




显微镜校准为何重要

准确性和可靠性



校准是指通过将仪器(例如光学显微镜)的测量结果与已知的测量标准或参照物进行比较,从而调整和验证仪器测量结果准确性的过程。准确度之所以重要,是因为准确度决定了仪器的测量值与真实值或公认值的接近程度

正确的校准可确保显微镜在规定的公差范围内提供准确可靠的结果。校准还可以通过减少或尽量减少系统误差来提高精度。由于光学显微镜可用于测量微米级距离和分辨精细细节,因此校准对于获得精确测量结果非常重要,应定期进行。


影响准确可靠结果的因素



显微镜测量中可能出现误差或不一致的因素有很多,例如显微镜使用不当、多个用户频繁使用显微镜进行不同的应用、设置不当、工作区或实验室的环境条件变化等。

为了确保所有显微镜用户的结果长期保持一致和可靠,除了定期校准之外,还应该采取以下措施:

  • 尽量减少或消除显微系统在配置或设置方面的错误,这些错误可能是由于多个用户或不同应用的更改造成的。

  • 保持显微镜使用环境在温度、湿度等方面的稳定。

  • 纠正使用过程中不必要或意外的变化,如错位、漂移等。

  • 在规定范围内按照选定的准则和标准操作显微镜。


履行准则和标准



显微镜校准还有助于确保符合特定应用的国际、地区和组织准则或标准。事实上,某些准则或标准,如 ISO、EN、ASTM、DIN 等,会要求对应用中使用的仪器进行校准认证。




如何校准显微镜

不同类型的光学显微镜



光学显微镜有变焦光学系统,如立体显微镜 [1] ,也有固定光学系统,如复合显微镜 [2] (参见图 1)。此外,还有不带目镜和集成显微镜摄像头的数码显微镜 [3]。传统显微镜有目镜,但通常也可以选择安装数码相机。徕卡显微系统公司提供一系列高品质的体视显微镜、复合显微镜和数码显微镜以及数码显微相机

图 1:例如A) M205 C 立体显微镜(带变焦光学系统);B) Visoria M 材料复合显微镜(带固定光学系统);以及 C) DVM6 数码显微镜。

使用这些显微镜进行准确可靠的测量都需要校准,每种显微镜都可以使用类似的程序进行校准。如今,测量通常使用数码显微相机,因此校准是通过显示器上显示的相机实时图像完成的。




逐步校准指南

如上所述,目前使用显微镜进行测量时,通常是在显示器上显示数字图像。校准显微镜之前,请确保相机工作正常。一般来说,校准可以通过软件完成,具体步骤如下:

1

在显微镜软件中找到并打开校准设置。使用显微镜相机现有的最高像素分辨率,并检查像素是否分档。

2

如果没有校准文件,则添加一个校准文件,或者创建一个新文件。

3

在显微镜平台上放置一个适当的测量基准,如平台测微计或带有精确长度刻度的直尺,并在特定放大倍率值下使其清晰聚焦(参见图 2)。

图 2:用于校准的台式测微计在低倍镜下的锐聚焦图像。每格 0.1 毫米。

4

然后,调整实时图像中出现的距离线,使其与参照物上与所需长度相对应的标记相匹配,然后在软件校准设置中标明所测量的长度(参见图 3)。

图 3:在较低的放大倍率值下,实时图像中的一条线用于指示平台测微计上的距离,以执行校准。

5

现在,根据您使用的是变焦显微镜还是固定光学显微镜,将放大倍率改为适当的较高值,并对每个放大倍率重复步骤 4(请参阅图 4)。


为了在更高的放大倍率值下进行精确校准,必须确认距离线的起点和终点位于平台千分尺标记的同一侧或边缘,例如,从左侧(或右侧)边缘到左侧(或右侧)边缘(参见图 4C 和上述视频)。

图 4:A-C:用同一台测微计在不同放大倍率值下进行校准。

6

最后,确认校准,以便软件保存数据。可填写校准报告以备存档(参见图 5)。

图 5:可使用徕卡显微镜提供的模板创建校准报告。

重要的一点之后,建议直接在测量基准上进行精确测量,检查校准是否正确。




用于校准的实用显微镜配件

这些推荐的附件有助于显微镜校准:

  • 用于清洁光学器件(如物镜)的无绒纸巾和溶液,以确保参照物的清晰实时图像。

  • 通过千分尺螺旋定位系统实现基准在平台上的精确水平移动。

  • 带精细聚焦功能的显微镜平台。




专业校准服务

通过徕卡显微系统及其合作伙伴提供的定期校准服务,用户可以根据已知标准长期跟踪显微镜测量的准确性。为了证明显微镜测量结果的准确性、可靠性和随时可用性,需要将测量结果与台式测微计或校准过的测试载玻片进行比较。对某些用户来说,利用这项服务可以节省时间,而且成本效益高。在某些行业和领域,所使用的仪器必须经过认证校准服务。校准频率通常取决于行业或应用,但通常在安装、维修和升级后进行,每年重复一次。


参考资料

1.E.E.Ippel、J.DeRose、D.Goeggel、A.Schué、C.Müller,《选择立体显微镜时应考虑的关键因素》:为您的应用选择合适的体视显微镜,科学实验室 (2023) Leica Microsystems

2.H.Rühl, Section:光学显微镜 - 一些基础知识,科学实验室(2012 年)徕卡显微系统公司

3.J.DeRose, Digital Inspection Microscope for Industrial Applications:如何选择合适的显微镜,帮助用户实现高效的工作流程,《科学实验室》(2023 年),徕卡显微系统公司


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徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系,不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门:生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有9大产品研发中心与4大生产基地,在二十多个国家设有销售及服务分支机构,总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。

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徕卡显微系统(Leica Microsystems)是德国著名的光学制造企业。具有175年显微镜制造历史,现主要生产显微镜, 用户遍布世界各地。早期的“Leitz”显微镜和照相机深受用户爱戴, 到1990年徕卡全部产品统一改为“Leica”商标。徕卡公司是集显微镜、图像采集产品、图像分析软件三位一体的显微镜生产企业。

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