显微课堂 | 与Helmut Gnaegi一起掌握聚合物超薄切片技术

• 超薄切片确保结构完整性——是制作高质量、无损伤聚合物切片的理想选择。

• 低温切片需要精准的操作——需要专用工具和精湛的技术。

• 正确的样品固定方法至关重要——可防止样品变形并保持材料特性。

• 切片刀的选择必须与应用相匹配——使用针对低温或室温条件选择合适的切片刀。

• 精确修块是基础——实现干净、一致的切片条带。

• 根据应用目的选择方法——根据成像目标（表面结构与内部结构）定制方法。

Helmut Gn?gi：我最初是一名机械工程师，但后来迷上了超薄切片技术。我们早期制造的都是手动抛光机，我看到了可以改进的地方。那时，像 Fernández-Morán这样的研究人员需要完美的大脑切片用于TEM观察。这一挑战成为我毕生的事业。

Helmut Gn?gi：超薄切片仍然是获得高质量聚合物切片的最干净的方法。FIB和等离子方法会造成损伤--高温、离子和变形。而超薄切片则能保持材料的特性，特别是对于精细或多层聚合物。

Helmut Gn?gi：在室温下，切片是漂浮的——你可以看到它们，也很容易拿起它们。而在低温下，情况就不同了。它们容易卷曲，更难处理。你需要技巧和合适的工具，比如用睫毛来压平或引导它们。

Helmut Gn?gi：正确的固定方式非常重要。如果样品弯曲，结构可能会发生变化。在进行超薄切片之前，应小心修剪聚苯乙烯等易碎聚合物。对于薄的聚合物薄膜，我一直建议使用凝胶超强胶将其夹在金属框架之间。对于精细的低温样品，OCT效果很好，但不要让它影响成像。

Helmut Gn?gi： 他们用错了刀，或者刀已经不锋利了。并不是所有的金刚石切片刀性能都一样，尤其是在低温条件下。有些金刚石切片刀是为了切割包埋树脂而制造的，而不是进行干切。此外，修块也经常被省略或做得不好。

提示：始终根据切片条件（低温与常温）选择合适的刀具类型，并确保精确修块，以获得干净的切片条带。

Helmut Gn?gi：了解您要切割的是什么，为什么要切割。是为了表面成像？内部结构？每种用途都需要不同的设置，而且要始终尊重切片刀。不了解应用，就无法制造出好的切片刀。

• 避免弯曲坚硬的聚合物；扣住，而不要切断。

• 使用AFM样品夹和胶水夹来固定薄箔样品。

• 修块质量很重要，要使用适合低温和室温的修块刀。

• 在冷冻过程中，要准备好处理可能比较棘手的波浪状切片（准备好毛发、睫毛或粘在木棍上的达尔马提亚狗毛发）。

• 并不是所有的金刚石切片刀都是一样的，请向您的供应商询问干切实验的兼容性（直接联系 DIATOME 或通过您当地的 Leica 销售专家）。

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