超实用干货（一) | 如何选择合适的C18色谱柱？

如图所示，2020版《中国药典》中肉苁蓉的含量测定中，色谱条件与系统适用性试验，仅有色谱柱填料类型，无具体规格。我们选择了4种C18色谱柱（见表）对肉苁蓉的对照品分别进行了分析测试。

①药典里注明“以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂”且没有特别指明规格明细的情况下，色谱柱的规格我们一般就选HPLC上最常用的规格：柱长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 μm。流动相pH在色谱柱pH使用范围内的前提下，选在中药饮片分析中通用性最强的全多孔型色谱柱1，碳载量为15%。 

②优化柱长。一般来说柱越短，分离所需时间越短。选用全多孔型色谱柱2，碳载量为15%，柱长150 mm，内径4.6 mm，粒径5 μm。

实验结果：在药典的流动相梯度下，肉苁蓉的对照品溶液中中毛蕊花糖苷未被洗脱下来，需要延长流动相的梯度毛蕊花糖苷才能出峰。并且松果菊苷的塔板数也只是勉强满足药典的要求。这就意味着色谱柱的寿命也不会很长。对于分析工作者来说，这不是一个高性价比的选择。

③优化碳载量。一般来说，碳载量越小，色谱柱的疏水作用能力越弱，对物质的保留越弱。选用全多孔型色谱柱3，碳载量为15%，柱长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 μm。

实验结果：肉苁蓉中的松果菊苷和毛蕊花糖苷的检测，整体分析时间在40分钟以内，优化了分析效率，同时理论塔板数也满足药典要求。

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