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【赛谱仪器小课堂】离子交换层析上机操作与方法设置

来源:苏州赛谱仪器有限公司 更新时间:2025-12-31 13:15:22 阅读量:32
导读:我们将聚焦最关键的一环——?上机操作与参数设置,手把手带你将理论落地为成果,轻松跑出漂亮的结果!


在前几期的内容中,我们系统讲解了离子交换层析的理论基础” 与 常见问题应对,从分离原理到实战案例,一步步帮你构建完整的知识体系。相信大家已经对离子交换层析有了全面认识。本期,我们将聚焦最关键的一环—— 上机操作与参数设置,手把手带你将理论落地为成果,轻松跑出漂亮的结果!





色谱柱准备



  • 选对柱子:根据目标蛋白的等电点及电荷性质,选择阴离子或阳离子交换层析柱,匹配对应分离范围。
  • 检查柱体:确保柱内无气泡、无裂纹,储存液一般为 20% 乙醇,使用前需用平衡缓冲液充分平衡。



流动相与样品前处理



  • 离子交换层析对缓冲液纯度和离子强度敏感,需使用 0.45μm 或 0.22μm 滤膜过滤并脱气的缓冲液与样品。

  • 样品需调节至与平衡缓冲液一致的 pH 值和离子强度,避免样品与缓冲液差异导致分离效果不佳。




仪器准备与接柱子



  • 设备与收集器开机并连接软件,确保软件与仪器通讯正常。
  • 为防止管路内存在气泡,可拧开排气阀,用注射器抽至管路中无气泡残留。
  • 装柱子前需根据离子交换层析柱的耐压规格设置压力报警,避免超压损坏柱子。
  • 手动操作设置较小流速,选择对应柱位,采用液滴对液滴的方式将层析柱接入系统,避免引入气泡。




设置方法



4.1 步骤解释


    4.2 图谱参考

    方法设置


    平衡


    进样


    柱冲洗



    洗脱


    再生



    7 CIP



    8保存



    4.2 方法保存

    整个方法设置完成后,点击软件中的保存” 按钮,可选择 另存为模板,方便后续同类样品实验直接调用,减少重复设置。


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    关于赛谱仪器

    苏州赛谱仪器有限公司(以下简称 “赛谱仪器)成立于 2011 年,是由世界知名自动化控制及分析仪器专家共同创办,集研发、生产、全球销售与服务于一体的国家高新技术企业。赛谱仪器专注于开发精密纯化、合成及相关设备,产品广泛应用于蛋白、抗体、疫苗、核酸、诊断原料、多肽等大 / 小分子生物制品领域。

    2022  4 月,赛谱仪器正式成为纳微科技(股票代码:688690.SH)的控股子公司。依托双方资源互补、应用技术共享及跨部门协同,赛谱仪器的自主创新能力得到进一步提升,未来将持续为客户提供更丰富、更完善、更稳定、更贴合实际应用的产品,以及更优质的服务。


    关于纳微科技

    苏州纳微科技股份有限公司(688690.SH)是一家以“以创新,赢尊重,得未来”为核心经营理念的国家高新技术企业。公司专注于高精度、高性能、高质量微球材料的研发与生产,是全球少数具备多品种、多规格微球产品供应能力的企业之一。

    凭借持续的创新驱动,纳微科技致力于打造全球领先的纳米微球精准制备和应用平台,产品涵盖硅胶正相、反相、HILIC、手性填料、固相萃取、聚合物反相、离子交换、疏水层析、亲和层析(Protein A、金属螯合、苯硼酸)、复合模式、凝胶渗透色谱及特殊功能填料;整合旗下纳谱分析(色谱柱与应用)、福立仪器(分析仪器)、赛谱仪器(蛋白纯化系统)等子公司关键资源,成功构建了从色谱填料→色谱柱→分离/分析设备→智能化解决方案的全产业链闭环,打造全球领先的“色谱全生态平台”。

    了解更多信息,敬请访问www.nanomicro.com

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