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小鹭推荐丨ATP信号太弱?试试这款增强ATP检测试剂盒!

来源:广州博鹭腾生物科技有限公司 更新时间:2025-07-09 12:15:20 阅读量:54
导读:多品类试剂尽在小鹭精选商城,还有免费试用和积分兑好礼哦!

不知名研究僧:小鹭小鹭,我们这次学习什么呀?

小鹭:我们今天学习新产品——增强 ATP 检测试剂盒


不知名研究僧:什么是 ATP ?

小鹭:ATP(三磷酸腺苷,Adenosine Triphosphate) 是细胞内的直接能量货币,由腺苷和三个磷酸基团组成,通过水解高能磷酸键释放能量(~7.3 kcal/mol),驱动代谢、运动、信号传导等生命活动。

ATP结构式


不知名研究僧:那我们检测ATP有什么作用呢?

小鹭:作用还挺多的,对于ATP的检测可以用于以下几个方面:

● 细胞活力评估:ATP含量与活细胞数正相关,用于药物毒性、增殖实验。  

● 微生物污染检测:快速筛查水、食品、医疗器械的微生物负载(如ATP拭子)。  

● 能量代谢研究:结合线粒体压力测试(如Seahorse),分析氧化磷酸化效率。  

● 凋亡/坏死监测:细胞死亡时ATP急剧下降。


不知名研究僧:小鹭,那目前我们都用什么方式去检测ATP?

小鹭:其实对于ATP检测有多种形式,我们会根据不用的应用范围来制定不同的检测方案,下面给你介绍几种不同的检测方式:

检测方法对比表


不知名研究僧:最后一个ATP生物发光灵敏度很高诶,而且耗时短,这个方法的检测原理是什么呢?

小鹭:不错哟,观察挺仔细哟!

ATP生物发光是根据萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase,也称荧光素酶)催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量而开发的一种检测方法。当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时,在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。

 ATP检测原理图


不知名研究僧:明白了,那这个检测方法有什么特点吗?

小鹭:特点太多啦!

●  操作简单

样品制备简单,通常 10-20 个样品可以在 30-60 分钟内测定完毕。

●  检测灵敏度高,线性范围宽

在0.1 nM至10 μM范围内有良好检测效果。

ATP检测试剂盒线性测试图

●  稳定性好

ATP检测的发光信号在30 min内保持稳定。

ATP检测试剂盒稳定性测试图

●  兼容性强

适用于哺乳动物细胞、细菌、组织匀浆。


不知名研究僧:小鹭,那你说这么有效的检测方法,操作起来会不会很繁琐啊?

小鹭:嘿嘿,想偷懒哟,步骤都给你准备好啦,只需要照着操作就行:

滑动查看更多

1. 样品测定的准备:(注意:样品裂解需在4℃或冰上操作) 

→ 对于贴壁细胞:

吸除培养液,按照6孔板每孔加入200μL裂解液的比例(即相当于细胞培养液量2mL的 1/10)加入裂解液,裂解细胞。 裂解后4℃12000g离心5分钟,取上清,用于后续的测定。(选做) 

→ 对于悬浮细胞: 

用离心管离心沉淀细胞,弃上清,轻轻弹散细胞,按照6孔板每孔的细胞量加入200μL裂 解液的比例加入裂解液,裂解细胞。 裂解后4℃12000g离心5分钟,取上清,用于后续的测定。(选做) 

→ 对于组织样品: 

按照每20mg组织加入约100-200μL裂解液的比例加入裂解液,然后用玻璃匀浆器或其它 匀浆设备进行匀浆。充分匀浆可以确保组织被完全裂解。裂解后4℃12000g离心5分钟, 取上清,用于后续的测定。

注:裂解后样品中的ATP可在-20℃保存至少一周。


2. 标准曲线测定的准备: 

冰浴上融解待用试剂,把ATP标准溶液用ATP检测裂解液稀释成适当的浓度梯度。具体的浓度需根据样品中ATP的浓度而定。初次检测可以检测0.01、0.03、0.1、0.3、1、3和 10μM这几个浓度,在后续的实验中,可以根据样品中ATP的浓度对标准品的浓度范围进行适当调整。


3. ATP浓度的测定: 

a.加100μLATP检测试剂到检测孔或检测管内。室温放置3-5分钟,以使本底性的ATP全部被消耗掉,从而降低本底。可以一次性把10-20个检测孔或检测管分别加上100μLATP 检测工作液,从而节省时间。 

在检测孔或检测管内加上20μL样品或标准品,迅速用枪(微量移液器)混匀,至少间隔 2秒后,用化学发光仪(luminometer)或液闪仪测定RLU值或CPM。(注:样品的体积可 以自行在10-100μL范围内调节。如果样品中的ATP浓度比较低则可以加入50-100μL样品,如果样品中ATP浓度比较高则可以加入较小体积的样品,同时标准品也需要使用相同的体积。如果样品中ATP的浓度特别高,可以用ATP检测裂解液稀释样品后再测定。


不知名研究僧:谢谢小鹭~步骤非常详细。但是要准备这么多东西太麻烦了,你有什么快捷的方式推荐嘛?

小鹭:嘿嘿,当然啦!我们家增强型ATP检测试剂盒早就给你们准备好了~

?? 小鹭温馨提示:

1.本试剂盒的检测试剂中含有荧光素酶,为取得良好的使用效果,可以进行分装保存,但需注意分装的容器不能有ATP污染。

2.本试剂对光敏感,如果储存时暴露在光照下,会加快发光强度的衰减。需避光操作荧光素酶遇光失活。

3.荧光素酶的活性对温度比较敏感,所以反应前细胞和ATP检测试剂均需平衡至室温后再进行测定,请勿室温存放;

4.检测时需使用适合于细胞培养的白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明 的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。


不知名研究僧:太好了,等我拥有这款增强型ATP检测试剂盒之后导师再也不担心我的实验了~不过小鹭,你看咱们都聊这么久了,有没有啥优惠呀?

小鹭:当然有啦,为了帮大家节省实验经费,最近在进行 买2送1 活动哟,相当划算!


不知名研究僧:赞!听说你们家之前做活动还送过1g黄金,这么好的机会我怎么没遇到!!!

小鹭:哈哈,别伤心,我们现在有 买1送1  +18元多得1件  任意下单即送礼品 等等多重活动,优惠力度赛过1g黄金,赶紧趁机补货!

注:活动最终解释权归生物科技有限公司所有。


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 博鹭腾 

博鹭腾作为一家集生命科学仪器设备的研发、生产、服务于一体的国家高新技术企业,目前已开发并上市了多款具有自主知识产权的产品,拥有活体成像、分子影像、细胞影像以及相应配套的试剂耗材四大系列产品,用户包括清华大学、中山大学、西北农林科技大学、北京协和医院、华西医院、维通利华等几百家高校、医院、企业等科研单位。

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