Copure 黄曲霉毒素总量免疫亲和柱：国货之光，为降本增效添一抹亮色

   称取花生油5g（精确至0.01g）于50mL离心管中，准确加入20mL乙腈-水溶液（84+16），涡旋混匀，于涡旋振荡器振荡上振荡20min，10000r/min离心5min。准确移取4mL上清液加入46mLPBS稀释混匀，作为上样液。

PBS缓冲盐溶液：称取8.00g氯化钠、1.20g磷酸氢二钠、0.20g磷酸二氢钾、0.20g氯化钾，用900mL水溶液，用盐酸调节pH至7.0，用水定容至1000mL。

设备：岛津Shimadzu LC-20A液相色谱仪

色谱柱：Copure真菌毒素专用HPLC柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）

检测器：荧光检测器（激发360nm 发射440nm） 

光化学柱后衍生器

流动相：水-甲醇（55+45，v/v）

洗脱方式：等度洗脱

流速：1 mL/min

进样体积：10 μL

图1 黄曲霉毒素B1、G1曲线浓度点为0.5ng/mL, 黄曲霉毒素B2、G2曲线浓度点为0.25ng/mL的液相色谱图

图2 花生油中黄曲霉毒素B1、G1添加浓度为1ng/mL，黄曲霉毒素B2、G2添加浓度为0.5ng/mL的液相色谱图（Copure）

图3 花生油中黄曲霉毒素B1、G1添加浓度为1ng/mL, 

黄曲霉毒素B2、G2添加浓度为0.5ng/mL的液相色谱图（进口R）

• 实验中使用到的玻璃器皿或者离心管，一定要清洗干净，尤其是用次氯酸等处理过的，否则会使结果偏低。

• 上样前样液中的有机相的浓度甲醇不超过10%，乙腈不超过20%，除此之外建议过滤纸，能除掉颗粒较大的杂质。无法满足时可用离心代替，使样液澄清。

• 稀释后的样液建议30min内上柱，放置时间久会有沉淀析出，会反过来吸附毒素，也会堵柱，影响过柱的效果。

• 免疫亲和柱最适使用温度为25℃左右，上样和淋洗前避免干柱，干柱的时间越久，凝胶收缩得越厉害，结果不理想。

• 当用氮气浓缩洗脱液时，氮气流不要太大，否则会损失部分目标物。

• 在依据 GB 5009.22-2016 《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素 B 族和 G 族的测定》对柱子进行验收时，通常要确保加标量与柱子的柱容量相匹配。尤其是采用黄曲霉毒素 B 族和 G 族混标进行验证时，必须考虑黄曲霉毒素 B 族和 G 族标液的总量，防止出现回收率验证结果偏低的情况。另外，您也可以选购Copure?高柱容量的黄曲霉毒素总量免疫亲和柱防止这种情况发生。