精准获取循环肿瘤细胞：EnrichArray与PRECI SCS荧光单细胞分选仪联手破解稀有细胞分选难题！

循环肿瘤细胞（CTCs）精准筛查对癌症早期诊断、精准治疗、预后评估等意义重大，但每10 mL血液里可能只有几个到几十个CTCs，传统分选方法准确率低、成本高、效率慢，操作复杂，让许多研究者望而却步。

长光辰英的EnrichArray细胞富集分选芯片与PRECI SCS-F荧光单细胞分选仪联用，可快速富集全血中的CTCs，还能进行富集CTCs的原位抗体标记，将CTCs逐一精准分离。

应用优势：四大创新，重新定义CTCs分选

 全血直接富集：无需预处理，避免细胞丢失，一步到位！

? 原位标记：芯片上原位进行抗体及探针等标记，适用于各类CTCs。

? 非接触式分选：激光与芯片介质相互作用，细胞活性超过80%，数据更可靠！

? 精准分离：单细胞得率>95%，提高CTCs及其他稀有细胞的获取效率。

从富集到单细胞分析的全流程

数据展示

1、CTCs的高效富集

在模拟试验中，CTCs在PBS和全血中的捕获效率分别能够达到87.4%和88.3%，处理通量最高可达15.0mL/min。富集的 CTC细胞活性为81.3 ± 6.5%（图1 b），富集后的CTC可进行原位培养，在PRECI SCS-F荧光单细胞分选仪上观察CTC荧光如图1 c 所示。

图1：EnrichArray细胞富集分选芯片细胞活力检测

2、CTC的单细胞精准分选

EnrichArray芯片富集后，微孔中包括CTCs及部分白细胞， 在芯片上原位使用特异性抗体对CTC进行多重特异性染色及鉴定分选（图2 a-c）。采用PRECI SCS-F单细胞分选仪能够稳定实现目标CTCs的逐一精准分离，单细胞得率>95%。

图2 采用PRECI SCS-F进行CTCs分选的流程及结果展示

图a为明场和荧光下微孔中CTC细胞的鉴定和定位；图b为PRECI SCS-F荧光单细胞分选仪的脉冲激光将细胞推出微孔的过程；图c为细胞接收器中成功接收单个CTC的示意图与显微图像

3、分选获取CTCs的下游研究

对分选得到的CTCs分别进行了单细胞培养与基于Smart-seq2的单细胞全程转录组测序（scRNA-Seq）（图3a）。结果表明，回收的CTCs保持了高活性（图3 b）和转录组完整性。回收单个CTC的cDNA产量超过4.5ng（图3c），scRNA-Seq的Q30得分均高于95.92%，表明了分选回收细胞的可靠性。

图3PRECI SCS-F分选后的单细胞可实现培养与单细胞转录组测序（scRNA-Seq）

图a为回收单个CTC后进行单细胞培养和scRNA-Seq的总体工作流程；图b为分离培养第0天、第3天和第5天的肿瘤细胞的培养增殖结果；图c为分选单个CTC逆转录的cDNA含量；图d为PRECI SCS-F单细胞分选仪LAMFX, X = 1,2,3,4,5和显微操作系统（MMX, X = 1,2,3,4,5）处理的单个CTC样品间的scRNA-Seq相关性热图；图e为图d得到的差异基因聚类表达热图

结论

该研究中PRECI SCS 荧光单细胞分选仪结合EnrichArray细胞富集分选芯片，实现了全血样品中CTCs的快速高效富集与单细胞无损分选，在细胞活性保持、分选通量及下游分析兼容性等方面均显著优于传统技术，为CTCs及其他稀有细胞的深入研究提供了新策略，为肿瘤异质性研究、药物筛选及个体化治疗提供了可靠平台。

注：仅供科学研究参考，不可用于医学诊断