LightCycler? PRO
实时荧光定量PCR仪
LightCycler? PRO 系统作为罗氏(Roche)推出的新一代实时荧光定量 PCR(qPCR)平台,凭借其高精度、多通道检测、灵活的工作流程以及开放的设计,在合成生物学研究中具有广泛的应用潜力。
合成生物学中常构建基因线路(如启动子、调控元件、逻辑门等),需要精确测量线路中各个元件的转录水平。LightCycler? PRO 支持 7 通道多重检测,可在单次反应中同时定量多个靶标(如报告基因、内参基因、调控因子),大幅提高基因线路表征的效率和数据一致性。
合成生物学常涉及时间序列实验,例如诱导型系统的动力学响应。LightCycler? PRO 的快速温度控制(加热速度达 4.4?℃/s)和实时数据采集功能,允许在短时间内完成多时间点的样本检测,从而获取基因表达的时间曲线,为数学模型校准提供高质量数据。
合成生物学库筛选(如启动子库、核糖体结合位点库)需要高通量、多参数的检测。系统支持 96 或 384 孔板,并可在 1 小时内完成高达 2,688 次检测,结合 7 通道多重能力,能够同时对多个样本的多个靶标进行定量,加速设计?构建?测试?学习(DBTL)循环。
合成生物学中常使用合成 DNA 片段或工程菌株,其纯度、拷贝数及稳定性需要严格监控。LightCycler? PRO 提供 绝对定量 功能,可通过标准曲线精确测定合成基因的拷贝数,确保后续实验的可靠性。
在基于 CRISPR 的基因组编辑或调控中,需要定量评估编辑效率或基因表达变化。系统兼容 SYBR Green I、水解探针、HybProbe 等多种化学方法,适合检测编辑后的等位基因频率或基因表达差异。其高分辨率熔解曲线(HRM)还可用于 SNP 或微小突变的快速分型。比如下图中的斑马鱼模型.
系统配备触摸屏界面、远程访问及数据管理软件,支持从实验设置到结果导出的半自动化工作流程。这对于需要高度可重复性的合成生物学实验尤为重要,有助于实现实验记录的标准化和团队协作。
LightCycler? PRO 系统在合成生物学中的应用主要体现在 高效、多参数、高精度的核酸定量 方面。其 7 通道多重检测、快速热循环、灵活的通量选择以及开放的平台设计,使其成为合成生物学研究中基因线路表征、动态监控、高通量筛选和质量控制的强大工具。
[11]. Product differentiation by analysis of DNA melting curves during the polymerase chain reaction.The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments.
[1,2,8,9,16,20,22]. LightCycler? PRO System实时荧光定量PCR仪https://diagnostics.roche.com/global/en/products/instruments/lightcycler-pro-ins-6284.html
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[7,15]. 罗氏公司新一代荧光定量PCR系统LightCycler PRO
[12]. LightCycler? Melt Genotyping Master
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