冷冻固定技术决定了电镜图像的真实性和分辨率
1
高压冷冻技术(HPF):厚样品的黄金标准
原理:
利用2100 bar高压降低水的冰点,配合液氮喷射实现12,000°C/s以上的极速降温,使样品中的水形成非晶态冰而非破坏性冰晶。
优点:
可处理200μm厚度的样品(如动植物组织、细胞团)
保存细胞器膜结构完整,最接近生理状态
毫秒级捕捉动态过程(需配合光/电刺激模块)
局限:
设备复杂度高,需专用仪器
液氮消耗量大(Leica EM ICE约30升/天,比同类型产品型号节省70%以上的液氮)
适用样品:
动物组织、植物组织、三维细胞培养物、细菌、病毒等
2
投入冷冻技术(Plunge Freezing):薄样品的效率之选
原理:
将样品载网直接投入-196°C液态乙烷/丙烷,实现超高速冷冻。
优点:
操作简便快速
成本低,无需复杂设备
完美保存表面纳米结构
局限:
仅能处理<10 μm超薄层样品
厚样品内部易形成冰晶
适用样品:
病毒颗粒、蛋白质溶液、脂质体、单层细胞
两大技术对比速查表 | ||
技术参数 | 高压冷冻(HPF) | 投入冷冻(Plunge Freezing) |
适用样品厚度 | ≤200 μm | ≤10μm |
技术复杂度 | 高(需专用设备) | 中 |
成本 | 高 | 低 |
核心优势 | 厚样品无冰晶 | 超快速表面固定 |
典型应用场景 | 组织切片、多细胞团等 | 病毒、蛋白溶液,单层细胞 |
徕卡显微系统:
全流程冷冻解决方案
针对不同研究需求,徕卡提供专业级电镜冷冻制样设备:
整合光/电刺激模块/活细胞和冷冻光电关联/冷冻断裂蚀刻,5种波长LED实现毫秒级动态捕捉,支持连续处理9个样品,日耗液氮仅30升,是神经突触传递等细胞和组织研究的利器。
Leica EM ICE
<点击图片了解详情>
应用案例:
Dinoflagellate_plankton
自动吸除多余液体,温湿度可控环境箱(4-60°C,湿度99%),实现薄液层样品的一键式玻璃化冷冻,操作效率提升50%。
独特的单面滤纸吸附设计,可有效保护样品不被挤压,尤其是外泌体、单层细胞等易被挤压形变的样品。
Leica EM GP2
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单面滤纸吸附
应用案例:细菌/蛋白/囊泡/微管
专为HPF样品设计,程序化温控替代流程(如-90°C维持72小时,连续可控梯度升温),搭配自动试剂处理系统,消除冰晶重结晶风险。
Leica EM AFS2
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电镜的世界里,
没有“差不多”的影像,
只有“恰到好处”的技术选择
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从冷冻到成像的全周期护航
徕卡显微咨询电话:400-630-7761
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