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电镜样品冷冻固定技术怎么选?一文理清两大核心技术

来源:徕卡显微系统(上海)贸易有限公司 更新时间:2025-08-22 16:00:30 阅读量:171
导读:电镜样品冷冻固定技术怎么选?一文理清两大核心技术


冷冻固定技术决定了电镜图像的真实性和分辨率

在电子显微镜研究中,样品冷冻固定技术是决定成像质量的关键环节。如何在瞬间“定格”生物样品的原始状态,避免冰晶损伤和化学假象?两大核心技术各展所长,本文将为您理清思路。


1

高压冷冻技术(HPF):厚样品的黄金标准


原理:

利用2100 bar高压降低水的冰点,配合液氮喷射实现12,000°C/s以上的极速降温,使样品中的水形成非晶态冰而非破坏性冰晶。

优点:

可处理200μm厚度的样品(如动植物组织、细胞团)

保存细胞器膜结构完整,最接近生理状态

毫秒级捕捉动态过程(需配合光/电刺激模块)

局限:

设备复杂度高,需专用仪器

液氮消耗量大(Leica EM ICE约30升/天,比同类型产品型号节省70%以上的液氮)

适用样品:

动物组织、植物组织、三维细胞培养物、细菌、病毒等


2

投入冷冻技术(Plunge Freezing):薄样品的效率之选


原理:

将样品载网直接投入-196°C液态乙烷/丙烷,实现超高速冷冻

优点:

操作简便快速

成本低,无需复杂设备

完美保存表面纳米结构

局限:

仅能处理<10 μm超薄层样品

厚样品内部易形成冰晶

适用样品:

病毒颗粒、蛋白质溶液、脂质体、单层细胞


两大技术对比速查表

技术参数

高压冷冻(HPF)

投入冷冻(Plunge Freezing)

适用样品厚度

≤200 μm

≤10μm

技术复杂度

高(需专用设备)

成本

核心优势

厚样品无冰晶

超快速表面固定

典型应用场景

组织切片、多细胞团等

病毒、蛋白溶液,单层细胞



徕卡显微系统:

全流程冷冻解决方案


针对不同研究需求,徕卡提供专业级电镜冷冻制样设备

Leica EM ICE高压冷冻仪

整合光/电刺激模块/活细胞和冷冻光电关联/冷冻断裂蚀刻,5种波长LED实现毫秒级动态捕捉,支持连续处理9个样品,日耗液氮仅30升,是神经突触传递等细胞和组织研究的利器

Leica EM ICE

<点击图片了解详情>

应用案例:

Dinoflagellate_plankton


Leica EM GP2投入冷冻仪

自动吸除多余液体,温湿度可控环境箱(4-60°C,湿度99%),实现薄液层样品的一键式玻璃化冷冻,操作效率提升50%。


独特的单面滤纸吸附设计,可有效保护样品不被挤压,尤其是外泌体、单层细胞等易被挤压形变的样品。

Leica EM GP2

<点击图片了解详情>

单面滤纸吸附

应用案例:细菌/蛋白/囊泡/微管


Leica EM AFS2冷冻替代仪

专为HPF样品设计,程序化温控替代流程(如-90°C维持72小时,连续可控梯度升温),搭配自动试剂处理系统,消除冰晶重结晶风险。

Leica EM AFS2

<点击图片了解详情>


电镜的世界里,

没有“差不多”的影像,

只有“恰到好处”的技术选择
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从冷冻到成像的全周期护航


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徕卡显微咨询电话:400-630-7761

徕卡显微公司地址:

徕卡显微系统(上海)贸易有限公司

上海市长宁区福泉北路518号,2号楼5楼

上海, 200335 China

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成都市锦江区东御街18号 百扬大厦1709室,CN-610063 China

徕卡显微系统西安分公司

陕西省西安市雁塔区南二环西段64号凯德广场写字楼8楼09室,710065 China

关于徕卡显微系统


徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪,作为德国著名的光学制造企业,徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史,逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用,并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。


徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系,不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门:生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地,在二十多个国家设有销售及服务分支机构,总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。

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关于作者

徕卡显微系统(Leica Microsystems)是德国著名的光学制造企业。具有175年显微镜制造历史,现主要生产显微镜, 用户遍布世界各地。早期的“Leitz”显微镜和照相机深受用户爱戴, 到1990年徕卡全部产品统一改为“Leica”商标。徕卡公司是集显微镜、图像采集产品、图像分析软件三位一体的显微镜生产企业。

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