样品预处理:将2mg/ml糖蛋白采用 Rapid PNGase F 实现快速高效的 N-糖释放,使用 RapiFluor-MS 进行快速荧光标记后用NH00501-MW 96孔板进行糖型抓取,具体流程如下:
活化:96孔板依次使用 200 μL水、200 μL乙腈溶液(即水:乙腈=15:85)活化;
上样:加载预处理后的样品400uL至活化后微孔板;
淋洗:600 μL 淋洗液(甲酸/水/乙腈=1:9:90)淋洗微孔板 2 次;
洗脱:用 30 μL洗脱液(200mM乙酸铵溶于5%乙腈溶液)洗脱 3 次,加入100μL DMF、200 μL 乙腈涡旋混合以备检测。
分别用了三个批次的 96 孔板,对比标准图谱
标准图谱
三个批次的图谱:
艾杰尔Glycan专用96孔微孔板是一款高性价比的HILIC分离模式固相萃取产品,采用1mL整体式微孔板,对酶切释放并经标记的 N-聚糖具备优异保留与回收效果,可适用于净化微量样品,减少基线干扰。
产品信息:
产品货号 | 产品名称 | 产品描述 |
NH00501-MW-Z | Glycan 96-Wellplate | 5mg/1mL/well,integral, 2/Pk |
同时该产品也适合2-AB的方式,如果您感兴趣,欢迎垂询。
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