GB 5009.26-2023食品中9种N-亚硝胺类化合物的测定

样品前处理

称取干鱼片基质样品5 g（精确到0.01 g）置于50 mL离心管中，加入5 mL水，振荡混匀，加入内标标准中间液（1 μg/mL）50 μL，向其准确加入10 mL乙腈，涡旋振荡2 min，置于-20℃冰箱冷冻20 min，加入陶瓷均质子1粒以及CNW dSPE分散固相萃取管（货号：SBEQ-CA8216-BZ，规格：4 g硫酸镁和1 g氯化钠），涡旋振荡2 min，置于冷冻离心机中，转速9 000 r/min，10℃离心5 min，上清液待净化。

取5 mL水于CNW 吡咯烷酮-聚苯乙烯二乙烯基苯净化管（货号：SBEQ-CA8864-25-DZ）中涡旋振荡后，立即加入5 mL上清液涡旋振荡1 min，置于冷冻离心机，9 000 r/min，10℃离心5 min，得净化液。

移取净化液于CNW dSPE基质分散固相萃取（货号：SBEQ-CA8219-B，规格：1.6 g硫酸镁和0.4 g氯化钠）中涡旋振荡2 min，置于冷冻离心机中，转速9 000 r/min，10℃离心5 min。取上层有机相经有机相尼龙针式滤器（货号：SCAA-104，规格：13 mm*0.22 μm）过滤后，上机测试。

注意事项：

N-亚硝基二甲基胺在空气环境、水源等中均有分布，且其特征离子相对较小，仪器背景值存在干扰，因此实验前需用乙腈代替试样对标准涉及试剂、耗材及试验器皿进行进行空白实验，需特别注意实验用水的洁净度，以保证方法空白本底符合标准要求。

液相色谱：

a) CD-BASEWAX气相毛细管色谱柱（30 m*0.25 mm*0.25 μm，货号：GAEQ-548169）；

b)进样口温度：220℃；

c)流速：1.0 mL/min；

d)进样量：3 μL；

e)进样方式：脉冲不分流进样，75psi，0.2min；

f)升温程序：初始温度40℃，保持0.5 min，以15℃/min升至190℃，保持1 min，以40℃/min升至240℃，保持10 min；

质谱条件：

a)离子源温度：230℃；

b)电离能量：70eV；

c)溶剂延迟：4min；

d)四级杆温度：150℃。

e)监测模式：多反应监测(MRM)模式，离子对参数见下表3-1。

参考GB 5009.26-2023《食品中N-亚硝胺类化合物的测定 第二法QuEChERS-气相色谱-质谱/质谱法》，采用CNW dSPE分散固相萃取管(SBEQ-CA8216-BZ)结合CNW吡咯烷酮-聚苯乙烯二乙烯基苯净化管（SBEQ-C A8864-25-DZ）和CNW dSPE基质分散固相萃取（SBEQ-CA8219-B）对干鱼片基质进行处理，并使用CD-BASEWAX气相毛细管色谱柱（GAEQ-548169）检测分析，内标法计算9种N-亚硝胺类化合物标准曲线方程线性良好，R2>0.995。干鱼片基质中高、低两水平的9种N-亚硝胺类化合物加标回收率均在75%-110%之间，各方面均可满足实验要求。