强强联合·再升级 | 复杂场景-全自动高通量CE-SDS样品前处理

CE-SDS技术在蛋白药物研发和质控中至关重要。药物开发各个阶段都有大量CE-SDS检测需要。特别是随着药物种类的多样化，单抗、双抗、融合蛋白和ADC等，不同类型蛋白药物CE-SDS检测的样品前处理条件也变得多样。生物药研发中，对CE-SDS提出更高的检测效率和通量需求，同时要求保持高分析灵敏度和分辨率，以优化研发流程，缩短产品研发周期，加快新药上市步伐。 

同时，与高通量检测相伴而行的是：如何提供同样高通量、高效率的样品前处理。

BioPhase? 8800与Biomek的联合，带来蛋白药物纯度高速分析的全新时代。

近期，与SCIEX联合开发的Biomek与BioPhase? 8800联用方案再次重磅升级。在之前方案测试前处理速度和96个样本重复性的基础上²（?重磅！全自动、高通量CE-SDS样品前处理及分离分析流程来了！），本次升级测试针对生物药研发CE-SDS检测中面临的一次实验检测多种不同类型样品，包括浓度各异，样品和试剂混合比例不同，前处理样品缓冲类型或pH不同，需要检测非还原或还原等复杂场景，考察方法学重复性、线性等，进一步探索自动化代替人工操作的适用性和可靠性。

以mAb-2和mAb-3两种抗体测试多样品复杂前处理场景：

整个前处理过程不同样品取样量不同，添加试剂类型不同，体积不同，如果人工操作非常容易取错试剂或加错位置导致失误，造成结果异常。

使用Biomek i-series自动执行前处理操作，根据待移取试剂所在试剂槽不同，同时或依次吸取不同来源孔、不同体积的试剂或样品。Biomek i-series自动调整每根移液probe的移液量和间距，按照最短路径加入BioPhase? 8800样品盘预设位置。全实验流程测试中，Biomek i-series自动化工作站能便捷地完成复杂场景下的CE-SDS样品前处理。

对mAb-1抗体样品进行自动化样品稀释准确性考察。3份稀释后的样品实测浓度与理论浓度接近，三个重复样品的实测浓度重复性好，RSD值为2.53%。结果表明Biomek i-series自动化移液工作站稀释样品准确性高，样品稀释30.65倍，母液移取量仅1.2 μL仍获得很好的重复性和准确性。

mAb-2和mAb-3抗体以不同CE-SDS处理方式各平行制备3份。从表2和表3结果可见，即使Biomek自动化工作站一次性执行了多种不同的移液过程，平行制备的3份样品迁移时间重复性RSD值为0.16%-0.47%，校准峰面积百分比重复性RSD值为0.02%-0.48%。结果表明，Biomek i-series自动化工作站平行制样准确度高，且BioPhase 8800不同通道毛细管重复性较好。

抗体样品mAb-4在Biomek i-series自动化工作站进行逐级稀释，并与其他试剂混合制备CE-SDS-NR和CE-SDS-R样品，处理好的样品盘转移至BioPhase? 8800系统进行数据采集。从图2非还原主峰 (NR) 和还原轻链 (R-LC) 、重链 (R-HC) 、非糖基化重链 (R-NGHC) 几个峰的线性结果看，各峰在0.1-2.0 mg/mL浓度下线性结果良好，非还原和还原的R²均在0.99以上，说明当前Biomek与BioPhase 8800联用方案线性准确度好。