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武汉尚恩生物 HEK-SV40-luc(人表皮角质形成细胞永生化(luc标记)) SNL-755参数

来源:武汉尚恩生物技术有限公司 更新时间:2026-03-19 16:15:02 阅读量:54

一、细胞核心特性

武汉尚恩生物SNL-755为人表皮角质形成细胞永生化株,通过SV40大T抗原稳定转染实现永生化,同时整合萤火虫荧光素酶(luc)基因作为报告标记。该细胞保留原代角质形成细胞的铺路石样形态与表皮功能特征,可稳定传代50代以上,解决原代细胞传代有限的痛点。

二、关键技术参数(厂家检测标准)

参数项 具体指标 检测方法
细胞来源 健康人表皮角质形成细胞(原代永生化) 组织分离鉴定
永生化方式 SV40大T抗原重组载体稳定转染 PCR验证抗原整合
标记基因 萤火虫荧光素酶(luc)基因(无泄漏表达) 荧光素酶活性检测
倍增时间 24~30小时 细胞计数法(37℃/5%CO₂)
冻存复苏存活率 ≥85% 台盼蓝染色计数
支原体检测 阴性 PCR法+培养法双重验证
内毒素含量 ≤0.5EU/mL 凝胶法检测
细胞纯度 ≥95% K19角质形成细胞标志物鉴定
luc表达稳定性 50代内RFLU变化≤10% 荧光素酶报告基因检测

三、推荐培养与冻存条件

  • 培养基:专用角质形成细胞无血清培养基(如K-SFM),添加重组人EGF(10ng/mL)、牛垂体提取物(BPE,0.1%);
  • 培养环境:37℃±0.5℃,5%CO₂(饱和湿度);
  • 传代操作:汇合度达80%~90%时,用0.25%胰酶-EDTA消化3~5分钟,按1:3~1:4比例传代;
  • 冻存液:90%完全培养基 + 10%DMSO(或厂家专用冻存液),程序降温(-1℃/min)后液氮保存;
  • 复苏操作:37℃水浴快速解冻,离心弃冻存液后重悬,接种至预温培养基。

四、主要应用场景

该细胞株适配实验室、科研及检测行业需求,核心应用包括:

  1. 皮肤生物学研究:角质形成细胞增殖、分化、凋亡机制,表皮屏障功能评估;
  2. 药物筛选:皮肤外用药物的细胞毒性(CCK-8)、药效(luc活体成像)验证;
  3. 基因功能分析:利用luc报告基因检测靶基因启动子活性、表达调控;
  4. 创面修复研究:细胞迁移(划痕实验)、增殖能力评估;
  5. 毒性测试:化妆品、环境污染物的皮肤刺激性/毒性替代实验(替代动物模型)。

五、实验注意事项

  • 避免反复冻融:细胞复苏后需传代2~3次再用于实验,保证活性稳定;
  • 培养基更换:每2~3天换液,避免代谢产物积累;
  • 标记验证:实验前用荧光素酶检测试剂盒确认luc活性,确保数据可靠性。

注:每批次产品附带COA(分析报告),包含上述参数的具体检测数据,可直接用于实验溯源。

17764018385
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