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武汉尚恩生物 HepG2-GFP(人肝癌细胞(GFP标记)) SNL-749参数

来源:武汉尚恩生物技术有限公司 更新时间:2026-03-19 16:15:03 阅读量:42
导读:武汉尚恩生物HepG2-GFP(人肝癌细胞GFP标记株)SNL-749,是经典HepG2细胞经稳定转染pEGFP-N1载体(CMV启动子)获得的工程细胞株,兼具肝癌生物学特性与可视化功能,为肿瘤机制研究、药物筛选等领域提供高效工具。本文梳理其核心特点、关键参数及应用场景,供实验室从业者参考。

武汉尚恩生物HepG2-GFP(人肝癌细胞GFP标记株)SNL-749,是经典HepG2细胞经稳定转染pEGFP-N1载体(CMV启动子)获得的工程细胞株,兼具肝癌生物学特性与可视化功能,为肿瘤机制研究、药物筛选等领域提供高效工具。本文梳理其核心特点、关键参数及应用场景,供实验室从业者参考。

一、核心特点

  • 稳定GFP表达:流式细胞术验证GFP阳性率>95%,传代10代内维持>92%,无瞬时转染的表达衰减问题;
  • 亲本特性保留:保持HepG2典型上皮样贴壁形态,白蛋白分泌能力与亲本株一致性>90%(ELISA检测);
  • 无微生物污染:每批次经PCR+培养法双重验证,支原体、细菌及真菌均为阴性;
  • 高复苏活力:冻存复苏后24h贴壁率>80%,72h活细胞率>85%(台盼蓝染色计数)。

二、关键参数(SNL-749型号)

项目类别 具体参数
细胞来源 人肝癌细胞HepG2稳定转染pEGFP-N1(CMV启动子)
细胞形态 上皮样、贴壁生长,多角形,核质比高
GFP荧光特性 胞质弥漫性绿色荧光,激发波长488nm,发射波长507nm
培养体系 DMEM高糖(含L-谷氨酰胺)+10%热灭活胎牛血清(FBS)+1%青霉素-链霉素双抗
培养环境 37℃、5% CO₂、饱和湿度
传代参数 0.25%胰蛋白酶-EDTA(含酚红)消化(≤3min);传代比例1:3~1:6;周期2~3天
冻存条件 冻存液:90% FBS + 10% DMSO;梯度降温(-80℃过夜→液氮长期保存)
质量鉴定指标 1. GFP阳性率>95%(流式);2. 支原体阴性;3. 活细胞率>90%(台盼蓝)
批次稳定性 不同批次间生长曲线差异<10%,GFP表达强度变异系数(CV)<5%

三、主要应用场景

  • 肿瘤迁移/侵袭研究:结合Transwell实验,通过GFP荧光直接追踪细胞运动轨迹,无需额外染色;
  • 药物筛选模型:用于肝癌细胞增殖抑制、凋亡诱导的高通量筛选,GFP信号可作为细胞数量的间接定量指标;
  • 基因功能验证:共转染目的基因后,通过共聚焦显微镜分析GFP与目的蛋白的共定位,验证基因表达与亚细胞定位;
  • 活体成像研究:经尾静脉注射或原位接种后,可通过小动物活体成像系统(IVIS)实时追踪肿瘤生长与转移过程。

四、培养注意事项

  • 胰酶消化控制:消化时间≤3min,避免过度消化导致细胞损伤,影响后续贴壁率;
  • 复苏操作规范:37℃水浴快速解冻(1~2min),避免DMSO长时间暴露对细胞的毒性;
  • 血清批次一致性:建议使用同一批次FBS,减少血清批次差异对细胞生长的影响;
  • 传代时机把控:当细胞汇合度达80%~90%时传代,避免过度生长导致细胞分化或活力下降。

武汉尚恩生物SNL-749型号HepG2-GFP细胞株,以稳定的GFP表达、保留的亲本生物学特性及严格的质量控制,成为肝癌研究领域的常用工具。实验室使用时需严格遵循上述参数与注意事项,确保实验结果的可靠性与重复性。

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