武汉尚恩生物 CBRH-7919(大鼠肝癌细胞) SNL-745参数

武汉尚恩生物CBRH-7919（大鼠肝癌细胞）SNL-745是肝癌基础研究与药物开发的经典模型细胞，源自SD大鼠原发性肝癌组织，经STR鉴定（大鼠特异性基因位点）及多维度微生物污染检测（支原体、细菌、真菌）合格，可支撑实验室常规实验及产业化前期药效评价需求。

一、基本生物学特征

• 种属来源：Rattus norvegicus（SD大鼠）
• 组织起源：原发性肝癌组织
• 细胞形态：贴壁生长，呈上皮样多边形，贴壁牢固；传代后24-48小时汇合率可达80%以上
• 核型特征：近二倍体（染色体核型分析验证，2n=42±1）

二、核心技术参数

• 细胞活力（冻存前）：≥90%，检测方法为台盼蓝染色排斥法
• 细胞活力（复苏后）：≥85%，检测方法为台盼蓝染色排斥法
• 倍增时间：28-32小时（常规培养条件），验证方法为每24小时细胞计数法
• 传代比例：1:3~1:5（细胞汇合率达80%-90%时），为经验优化的最佳传代比例
• 支原体检测：阴性，采用荧光定量PCR法+培养法双验证
• 细菌/真菌检测：阴性，通过肉汤培养法+镜检确认
• 冻存条件：液氮长期储存（-196℃），冻存液配方为90%胎牛血清（FBS）+10% DMSO
• 复苏存活率：≥70%（批量实验验证数据），复苏后24小时贴壁细胞计数达标

三、推荐培养条件

1. 基础培养基：DMEM高糖培养基（含L-谷氨酰胺，不含丙酮酸钠）
2. 血清补充：10%热灭活胎牛血清（FBS）
3. 培养环境：37℃恒温，5% CO₂饱和湿度无菌培养箱
4. 换液频率：细胞汇合率达60%-70%时换液，每2-3天1次
5. 传代时机：细胞汇合率80%-90%时传代，避免过度汇合导致接触抑制

四、主要应用场景

• 肝癌机制研究：用于探索肝细胞癌变信号通路（如PI3K/Akt、MAPK通路）、代谢重编程等
• 抗肿瘤药物筛选：评估化疗药物（5-氟尿嘧啶、顺铂）、靶向药物的细胞毒性及IC50值
• 毒理学研究：评价化学毒物（黄曲霉毒素B1）对肝癌细胞的损伤效应及分子机制
• 基因功能验证：通过siRNA转染、过表达载体构建，验证特定基因在肝癌中的功能

五、关键注意事项

1. 冻存复苏：采用梯度降温法（4℃ 30min→-20℃ 2h→-80℃过夜→液氮储存），复苏时37℃水浴快速解冻（1-2min）
2. 污染防控：超净工作台内无菌操作，每3个月定期检测支原体，避免交叉污染
3. 代数限制：关键实验建议使用代数≤20代的细胞，避免代数过高导致细胞特性改变

武汉尚恩生物SNL-745号CBRH-7919细胞系经严格质控，参数稳定，是肝癌研究领域的可靠工具。实验需严格遵循上述条件，确保结果重复性与准确性。