Hi 小伙伴们大家好,欢迎来到“生物样本库避坑指南”系列专栏第五期,本期我们继续介绍种质资源库—动物资源的建设要点。
保藏流程:动物样本通常包括采集、接收、制备、保存、运输、储存、分发、销毁等过程。
动物资源样本采集应建立记录和实施动物保定程序以避免或最小化在保定过程中对动物造成的不适痛苦和疼痛。可依据不同动物类型进行血液,尿液,粪便,趾甲,毛发,乳样,种质及其他动物源性样本制定采集方法。
具体可参考下表:
固体组织样本采集示例
血液样本采集方法示例
尿液样本采集方法示例
反刍动物和小型哺乳动物乳样采集方法示例
其他样本采集方法示例
样本处理及存储:可针对不同样本类型选择合适的固定
固体样本:可采取液氮速冻对分装样本或待分裂样本进行处理,可选择保护剂用于维持样本稳定性,对于细胞分类可采取机械法或酶解法处理组织样本;而核酸及蛋白的提取可以从石蜡包埋的组织样本或冷冻组织样本中提取。
种质样本:主要包括胚胎,卵子及精子,宜根据不同的生物样本类型、物种和预期要求采用合适的方法,并记录遗传来源、阶段、保存和复原操作说明以及胚胎的数量;种质样本应长期存储于液氮环境中。
血液样本:全血样本分离前可选用添加剂以减少 溶血,若无分离必要,可保存在-70℃及以下环境,后续可用于DNA或RNA分离。血液衍生物可根据如淋巴细胞,循环细胞游离DNA等目标类型选择可是处理方式后,存储于-70环境中。若涉及核酸等物质长期保存可储存于液氮中。
尿液及乳样样本:可在24h(尿液)/4h(乳样)内,在2-8℃条件下进行存储,通过离心法来分离细胞及其他物质。
粪便样本:可将新鲜粪便用无菌采集管是保存并立即冷冻,若进行DNA提取使用了保存液,需在最终存储前将保存液离心去除。
羽毛样本:需去除羽毛上的碎片和有机物(如异丙醇等温和有机溶剂等方式)
鱼鳍样本:保存在含添加剂的容器内(如采用80%酒精保存样本用于DNA提取)
鳞片样本:可采用95%的非变形酒精,或将新鲜鳞片保存在滤纸之间,阴凉通风处干燥后存储于室温环境(低湿度)中。
卵白样本:可使用离心和抽吸,或 过滤卵白的方式分离球蛋白和可溶性蛋白,卵白中其他蛋白可根据其特性结晶或分离获得。
毛发趾甲:用于DNA提取的毛发或趾甲可在室温下短暂存放,长期存储应在分析前置于-70℃条件下存储。
从活体保种场、细胞培养室到-196℃的液氮罐,动物种质资源库的建设是一条环环相扣的技术链。建设动物种质资源库,已不再是一项单纯的科研工作,而是关乎国家粮食安全、生物多样性与未来育种核心竞争力的战略行动。它需要我们前瞻性的规划、持续性的投入与跨领域的协作。唯有将今天的行动,视为对未来的投资,我们才能牢牢守住这份沉甸甸的“国家畜禽种质资源家底”,让今天的多样性,成为明天育种创新的源泉。
参考资料:
1. GB/Z 44314-2024 生物技术 生物样本保藏 动物生物样本保藏要求
赛默飞的生物样本库解决方案提供全流程合规、高质量存储的全案,以齐全的设备与创新技术,覆盖从+4℃到-196℃的全线低温存储环境下安全保存,为每一份珍贵样本提供“全生命周期”的精准守护,TSX系列超低温冰箱及CryoExtra液氮储存罐,提供高质量存储环境,Nalgene?和Nunc?冻存耗材,避免交叉污染,保障样本活性。
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